Anticorpo Monoclonale Anti-Fosfo-GSK3β-S9 per WB, ELISA - P49841

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della GSK3β

• La GSK3β funziona come chinasi costitutivamente attiva che regola negativamente la sintesi del glicogeno, la sintesi proteica e la segnalazione Wnt fosforilando substrati chiave come GYS1, EIF2B e CTNNB1/beta-catenina. Riferimenti correlati: PMID:11430833, PMID:12554650, PMID:8397507

• Nella via Wnt, la GSK3β forma un complesso di distruzione con APC e AXIN1, fosforilando la beta-catenina per promuoverne la degradazione dipendente dall'ubiquitina, inibendo così l'espressione dei geni bersaglio di Wnt. Riferimenti correlati: PMID:12554650

• La GSK3β fosforila MAPT/TAU su Thr-548, riducendo significativamente la sua capacità di stabilizzare i microtubuli, ed è coinvolta nella formazione di grovigli neurofibrillari nella malattia di Alzheimer. Riferimenti correlati: PMID:14690523

• È un regolatore chiave dell'orologio circadiano, fosforilando e promuovendo la degradazione dei componenti centrali dell'orologio BMAL1, CLOCK e PER2. Riferimenti correlati: PMID:19946213, PMID:28903391

• La proteina è prevalentemente citoplasmatica ma si localizza anche nel nucleo e nella membrana cellulare.

• La GSK3β è espressa in vari tessuti tra cui testicolo, timo, prostata, ovaio e a livelli inferiori nel polmone, cervello e rene; colocalizza con PKR e TAU nel cervello affetto dalla malattia di Alzheimer.

• Inoltre, la GSK3β fosforila JUN (riducendo la sua affinità per il DNA), NFATC1 (promuovendo l'esportazione nucleare) e regola l'apoptosi, la segnalazione dell'insulina e lo sviluppo neuronale. Riferimenti correlati: PMID:1846781, PMID:9072970

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato è un peptide fosforilato sintetico circostante Ser9 della GSK3β umana. Per il Western blotting, è consigliabile includere inibitori delle fosfatasi durante la lisi cellulare e verificare il peso molecolare a circa 47 kDa.
• Per confermare la specificità fosfo-, considerare il trattamento dei lisati cellulari con λ-fosfatasi prima dell'analisi o l'esecuzione di saggi di competizione peptidica con il peptide fosfo- e non fosfo-.
• Per l'ELISA, assicurarsi che l'antigene rivestito sulla piastra preservi l'epitopo fosfo-; si raccomanda un tampone di rivestimento delicato e condizioni di blocco ottimizzate. Validare la linearità del segnale e il fondo nella matrice campione pertinente.

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