Anticorpo policlonale coniglio Anti-Fosfo-GYS1-S641 per WB, ELISA - P13807

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del Glicogeno sintasi 1 (GYS1)

• GYS1 codifica l'isoforma muscolare del glicogeno sintasi, un enzima chiave nella biosintesi del glicogeno; lo splicing alternativo genera multiple isoforme (parola chiave: Splicing alternativo).
• Il glicogeno sintasi opera in cooperazione con la glicogenina e l'enzima di ramificazione del glicogeno per allungare il primer del glicogeno trasferendo il glucosio dall'UDP-glucosio all'estremità non riducente delle catene alfa-1,4-glucano.
• L'enzima è regolato allostericamente e subisce fosforilazione su più siti, inclusi Ser641, modulando la sua attività in risposta all'insulina e ai segnali metabolici (parole chiave: Enzima allosterico, Fosfoproteina).
• Predominantemente espresso nel muscolo scheletrico, GYS1 si trova anche in altri tessuti contenenti glicogeno, giocando un ruolo centrale nell'immagazzinamento del glucosio e nell'omeostasi energetica.
• Le mutazioni in GYS1 sono associate alla malattia da accumulo di glicogeno e al diabete mellito, evidenziandone la significatività clinica (parole chiave: Variante di malattia, Diabete mellito).
• Come membro della famiglia delle glicosiltransferasi, GYS1 catalizza la formazione di legami alfa-1,4-glicosidici, un passaggio critico nella sintesi del glicogeno.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Dato che questo anticorpo mira a un sito di fosforilazione, assicurarsi che GYS1 sia fosforilato nelle condizioni sperimentali; includere inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare il segnale fosforilato.
• Per il WB, prevedere una banda a circa 84 kDa; convalidare la specificità fosforo-trattando i campioni con lambda fosfatasi o utilizzando un controllo di blocco con peptide non fosforilato.
• Per l'ELISA, utilizzare il peptide fosforilato come controllo positivo e il peptide non fosforilato corrispondente per valutare la specificità di legame.
• La reattività crociata è confermata per umano, topo e ratto; se utilizzato in altre specie, verificare la conservazione della sequenza flanking di Ser641 tramite allineamento.
• Le diluizioni di lavoro ottimali per WB ed ELISA devono essere determinate empiricamente; iniziare con la raccomandazione del produttore e titolare in base al sistema del campione.
• Utilizzare tamponi di blocco senza fosfato per minimizzare le potenziali interazioni non specifiche con gli epitopi fosforilati.

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