Anti-Phospho-Histone H2A-S129 Coniglio pAb - P04911

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H2A.1

• L'istone H2A.1 è un componente centrale del nucleosoma, l'unità ripetitiva fondamentale della cromatina. I nucleosomi avvolgono e compattano il DNA, regolando così l'accessibilità del DNA per la trascrizione, la replicazione, la riparazione e la stabilità cromosomica.
• Questo istone è coinvolto in modo cruciale nella risposta al danno del DNA, in particolare nella riparazione delle rotture del doppio filamento di DNA (DSB) tramite ricombinazione omologa e meccanismi di giunzione delle estremità non omologhe.
• Le modifiche post-traduzionali dell'Istone H2A.1, come la fosforilazione alla Ser129 (equivalente alla S139 di H2AX nei mammiferi), l'acetilazione, la metilazione e l'ubiquitinazione, formano un codice istonico che modula la struttura della cromatina e recluta le proteine di riparazione nei siti di danno.
• La proteina è localizzata esclusivamente nel nucleo ed è associata ai cromosomi durante tutto il ciclo cellulare.
• L'Istone H2A.1 di S. cerevisiae è codificato dal gene HTA1 e appartiene alla famiglia degli istoni H2A, che include varianti altamente conservate negli eucarioti.
• Le parole chiave associate a P04911 includono danno al DNA, riparazione del DNA, fosfoproteina, nucleosoma centrale e coniugazione Ubl, sottolineando i suoi ruoli chiave nel mantenimento del genoma.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico corrispondente alla Ser129 fosforilata dell'Istone H2A del lievito. Pertanto, l'anticorpo riconosce specificamente la forma fosforilata; assicurarsi che le condizioni sperimentali preservino lo stato di fosforilazione (ad esempio, utilizzare inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione).
• Per l'IHC-P, i metodi di recupero dell'antigene e i protocolli di fissazione dei tessuti dovrebbero essere ottimizzati per epitopi fosforilati. Considerare di testare l'anidride citraconica o il recupero dell'epitopo indotto dal calore in tampone citrato (pH 6.0) se i metodi standard danno una colorazione debole.
• Nell'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per il rilevamento di peptidi o proteine H2A fosforilati. Verificare la reattività crociata con il bersaglio endogeno nelle specie rilevanti (umano, ratto) includendo controlli appropriati e bloccando con peptidi non fosforilati.
• Sebbene l'immunogeno sia derivato dal lievito, è stata riportata reattività crociata per umano e ratto. Tuttavia, l'allineamento delle sequenze rivela che la regione attorno alla Ser129 è altamente conservata negli eucarioti superiori; si raccomanda comunque la validazione nel sistema campione specifico.

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