Anticorpo policlonale Anti-Fosfo-Histone H3-S10 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16695 / P68431

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione dell'istone H3.1t (H3.4)

• L'istone H3.1t (conosciuto anche come H3.4, H3/g, codificato dal gene H3-4/HIST3H3) è una variante istonica core specifica del testicolo che sostituisce l'istone H3 canonico nei nucleosomi durante la spermatogenesi.
• Come componente core del nucleosoma, l'istone H3.1t avvolge e compatta il DNA nella cromatina, limitando l'accessibilità ai macchinari di trascrizione, riparazione e replicazione.
• La famiglia genica H3 include molteplici varianti dipendenti dalla replicazione (come HIST1H3 e HIST2H3) e indipendenti dalla replicazione (H3.3), di cui H3.1t è un membro tessuto-specifico.
• L'istone H3.1t si localizza nel nucleo ed è un componente della cromatina cromosomica, dove subisce estese modifiche post-traduzionali (PTM) tra cui fosforilazione, acetilazione, metilazione e ubiquitinazione, collettivamente definite codice istonico.
• La fosforilazione dell'istone H3 sulla serina 10 (H3S10ph) è un marcatore mitotico chiave, associato alla condensazione cromosomica, e svolge anche un ruolo nell'attivazione trascrizionale dei geni immediate-early.
• La specificità tissutale di H3.1t per le cellule testicolari suggerisce una funzione specializzata nel rimodellamento della cromatina durante la spermatogenesi, potenzialmente contribuendo alla fertilità maschile.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Questo anticorpo è stato prodotto contro un fosfo-peptide sintetico corrispondente alla Serina 10 dell'istone H3 umano. Per garantire una rilevazione specifica della fosforilazione, si consiglia di utilizzare lisati cellulari trattati con fosfatasi o non stimolati come controlli negativi nel Western blotting.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P) e l'immunofluorescenza (IF/ICC) possono essere necessari passaggi di permeabilizzazione e recupero dell'antigene; ottimizzare le condizioni di fissazione e blocco per preservare l'epitopo fosforilato.
• L'ampia reattività crociata prevista tra specie suggerisce che l'anticorpo può rilevare il fosfo-H3-S10 in tutti i vertebrati; si raccomanda comunque la validazione con campioni di controllo positivo e negativo per ogni specie.
• Dato il piccolo peso molecolare dell'istone H3 (~15 kDa), utilizzare gel SDS-PAGE ad alta percentuale (es. 15%) e dimensioni appropriate dei pori della membrana (0,2 µm) per un trasferimento e una rilevazione efficienti.
• Nelle applicazioni ELISA e IF, titolare l'anticorpo per determinare la diluizione di lavoro ottimale, poiché le concentrazioni assolute non sono state determinate empiricamente per questo prodotto.

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