Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-Fosfo-Istone H3-S28 per WB, IP, ELISA - Q16695 / P68431

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'Istone H3 (Fosfo-S28)

• L'Istone H3 è un componente centrale del nucleosoma, l'unità fondamentale della cromatina, e svolge un ruolo centrale nel compattare il DNA e nel regolarne l'accessibilità.
• Esistono molteplici varianti di H3; Q16695 codifica per l'Istone H3.1t specifica per i testicoli (nota anche come H3/g, H3.4), ma il prodotto può riconoscere altre varianti di H3, incluso H3.1 (P68431), grazie all'elevata conservazione della sequenza.
• Come parte del nucleosoma, H3 contribuisce a processi nucleari essenziali come la regolazione della trascrizione, la riparazione del DNA, la replicazione del DNA e la stabilità cromosomica.
• L'Istone H3 è soggetta a una complessa serie di modificazioni post-traduzionali (PTM), collettivamente definite "codice istonico", che modulano la struttura e la funzione della cromatina. Le principali PTM includono acetilazione, metilazione, fosforilazione, ubiquitinazione e altre.
• La fosforilazione in Serina 28 (S28) fa parte del codice istonico ed è implicata nella dinamica della cromatina, influenzando la mitosi e l'attivazione genica.
• La localizzazione subcellulare è limitata al nucleo ed è associata ai cromosomi, coerente con il suo ruolo legato alla cromatina.
• H3.1t mostra un'espressione tessuto-specifica nelle cellule testicolari, suggerendo funzioni specializzate nella spermatogenesi o nel rimodellamento della cromatina durante lo sviluppo delle cellule germinali.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo è stato generato contro un peptide sintetico fosforilato intorno a S28; pertanto, si prevede che rilevi specificamente la forma fosforilata dell'Istone H3. Per preservare la fosforilazione durante la preparazione del campione, includere inibitori delle fosfatasi nei buffer di lisi.
• Per il western blotting (WB), il peso molecolare previsto è ~15 kDa e dovrebbe essere osservata una banda nitida. Considerare l'uso di estratti nucleari o istoni estratti con acido per una rilevazione più arricchita.
• Nell'immunoprecipitazione (IP), il formato monoclonale di coniglio fornisce alta affinità e specificità; convalidare empiricamente le condizioni di legame ed eluizione nel campione target.
• Per l'ELISA, il peptide fosforilato può essere utilizzato come controllo positivo; ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevazione per minimizzare la reattività crociata con peptidi non fosforilati.
• È prevista reattività crociata per un'ampia gamma di specie in base alla conservazione della sequenza; tuttavia, verificare sempre con appropriati controlli specifici per specie.

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