Anticorpo policlonale coniglio Anti-Fosfo-Istona H3-T45 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16695 / P68431

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della fosforilazione dell'Istona H3 a Thr45

• L'istona H3 è un componente istonico core del nucleosoma, essenziale per la compattazione del DNA in cromatina. Gioca un ruolo chiave nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione e nella stabilità cromosomica, con l'accessibilità del DNA modulata da modificazioni post-traduzionali (codice delle istone).
• Questo prodotto riconosce la H3 fosforilata a Thr45 (T45); il bersaglio include l'isoforma specifica del testicolo Istona H3.1t (H3/g, H3.4) codificata dal gene H3-4 e le isoforme canoniche dipendenti dalla replicazione Istona H3.1.
• La famiglia di geni H3 comprende numerosi geni senza introni che codificano proteine H3 identiche o altamente simili, con la variante core H3.1 che è la più abbondante. Il sito di fosforilazione Thr45 è conservato attraverso le isoforme H3.
• A livello subcellulare, la H3 si localizza nel nucleo ed è associata ai cromosomi, coerentemente con il suo ruolo nell'architettura della cromatina durante tutto il ciclo cellulare.
• La H3 subisce numerose modificazioni post-traduzionali, tra cui acetilazione, metilazione, fosforilazione, citrullinazione e ubiquitinazione, che collettivamente stabiliscono distinti stati della cromatina. La fosforilazione a Thr45 è implicata negli eventi di rimodellamento della cromatina.
• L'espressione tessuto-specifica di H3.1t è arricchita nelle cellule testicolari, ma a causa dell'alta omologia di sequenza, questo anticorpo fosfo-specifico rileva anche H3.1 e altre proteine H3 canoniche in un'ampia gamma di specie e tessuti.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico attorno a Thr45; per una fosfo-specificità ottimale, considerare la validazione con saggi di competizione con non-fosfopeptidi o trattamento con fosfatasi nei sistemi di campionamento.
• Per Western blot (WB), immunoprecipitazione (IP), immunofluorescenza (IF/ICC) e immunohistochemistry (IHC-P), le diluizioni devono essere ottimizzate per ogni saggio e tipo di tessuto.
• Data la conservazione del sito di fosforilazione T45, è prevista la reattività incrociata con altre specie. Verificare il rilevamento nella specie di interesse e includere appropriati controlli positivi (es. lisati di cellule mitotiche per la fosforilazione).
• Per le applicazioni ELISA, assicurarsi di un rivestimento del peptide appropriato per preservare il riconoscimento dell'epitopo fosforilato.

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