Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Fosfo-HSF1-S307 per WB, ELISA - Q00613

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di HSF1

• Il fattore di trascrizione da shock termico 1 (HSF1) è un fattore di trascrizione indotto dallo stress che svolge un ruolo centrale nella risposta da shock termico attivando l'espressione di chaperon molecolari (HSP) che proteggono le cellule dai danni. Riferimenti correlati: PMID:11447121, PMID:12659875, PMID:12917326
• Nelle cellule non stressate, HSF1 è mantenuto in uno stato monomerico inattivo attraverso l'interazione con un complesso multichaperon contenente HSP90. Riferimenti correlati: PMID:11583998, PMID:16278218, PMID:9727490
• In seguito a stress, HSF1 omotrimerizza e si lega agli elementi da shock termico (HSE) nei promotori dei geni HSP per avviare la trascrizione. Riferimenti correlati: PMID:10359787, PMID:11583998, PMID:12659875
• La fosforilazione in Ser307 è una modificazione regolatoria chiave che modula l'attività trascrizionale di HSF1 e l'attenuazione della risposta allo stress.
• HSF1 regola anche la processazione del pre-mRNA, l'esporto nucleare dell'mRNA di HSP70, e svolge ruoli nella mitosi, riparazione del DNA e proliferazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:14707147, PMID:17897941, PMID:18794143, PMID:26359349, PMID:26754925
• La localizzazione subcellulare è dinamica: HSF1 si trova nel nucleo, citoplasma, centrosoma e cinetocore a seconda dello stato cellulare.
• HSF1 è coinvolto nella riattivazione dell'HIV-1 latente legandosi al promotore LTR virale e reclutando fattori di allungamento trascrizionale.
• HSF1 subisce multiple modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione, che ne regolano l'attività.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Poiché questo anticorpo riconosce il sito di fosforilazione Ser307, verificare la fosfo-specificità mediante saggio di competizione con peptide o trattando le cellule con inibitori della fosfatasi.
• Per il WB, è attesa una banda a circa 57 kDa. Utilizzare lisati di cellule umane sottoposte a shock termico (es. HeLa o Jurkat) come controlli positivi; includere controlli non trattati per confermare la fosforilazione indotta da stress.
• ELISA: adatto per rilevare Fosfo-HSF1-S307 in campioni umani. Considerare l'uso di un anticorpo di cattura contro HSF1 totale e la rilevazione con questo anticorpo fosfo-specifico per ELISA sandwich.
• Diluenti e tamponi di bloccaggio dovrebbero essere ottimizzati empiricamente; la BSA è generalmente preferita al latte per gli anticorpi fosfo-specifici.

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