Anticorpo policlonale coniglio Anti-Fosfo-HSL-S563 per WB, ELISA - Q05469

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della lipasi sensibile agli ormoni

• La lipasi sensibile agli ormoni (HSL), codificata dal gene LIPE, è una lipasi multifunzionale con ampia specificità di substrato, idrolizzando triacilgliceroli, diacilgliceroli, monoacilgliceroli, esteri del colesterolo ed esteri del retinile (PubMed:15716583, PubMed:15955102, PubMed:19800417).
  Riferimenti correlati:
  PMID:15716583
  PMID:15955102
  PMID:19800417

• La HSL idrolizza preferenzialmente i diacilgliceroli rispetto ai triacilgliceroli e ai monoacilgliceroli, con una preferenza per la posizione sn-3 dello scheletro di glicerolo nei diacilgliceroli.

• Nel tessuto adiposo e nel cuore, la HSL mobilizza principalmente i trigliceridi immagazzinati in acidi grassi liberi per l'energia, mentre nei tessuti steroideogenici converte gli esteri del colesterolo in colesterolo libero per la produzione di ormoni steroidei.

• La HSL catalizza anche l'idrolisi del 2-arachidonoilglicerolo, un endocannabinoide, e del 2-acetile monoalchilglicerolo etere, un precursore nella sintesi del fattore di attivazione delle piastrine.

• A livello subcellulare, la HSL si localizza nel citosol, nelle gocce lipidiche e nella membrana cellulare, incluse le caveole; il suo translocazione è regolata dalla fosforilazione.

• La HSL è una fosfoproteina e la sua attività e localizzazione intracellulare sono modulate dalla fosforilazione a più residui; questo anticorpo rileva specificamente la HSL fosforilata alla serina 563.

• La proteina è altamente espressa nei testicoli, ma è presente anche nel tessuto adiposo, nel cuore e nei tessuti steroideogenici, riflettendo i suoi ruoli chiave nell'omeostasi energetica e nella steroideogenesi.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato corrispondente alla Ser563 della HSL di ratto; verificare l'allineamento della sequenza con la HSL umana, murina e di ratto per garantire la reattività crociata.

• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto della HSL è di circa 117 kDa; considerare l'uso di una percentuale di gel appropriata e condizioni di trasferimento per proteine ad alto peso molecolare.

• Validare la specificità dell'anticorpo trattando i campioni con fosfatasi o utilizzando controlli di peptide non fosforilato.

• Per l'ELISA, ottimizzare le condizioni di rivestimento e includere uno standard di peptide fosforilato per quantificare i livelli di fosforilazione.

• Utilizzare condizioni di stimolazione appropriate (es. isoproterenolo per gli adipociti) per indurre la fosforilazione della HSL alla Ser563 prima del rilevamento.

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