Anticorpo policlonale coniglio anti-Fosfo-HSL-S660 - Q05469

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Lipasi Sensibile agli Ormoni

• La lipasi sensibile agli ormoni (HSL), codificata dal gene LIPE, è un enzima multifunzionale con ampia specificità del substrato, che catalizza l'idrolisi dei triacilgliceroli (TAG), diacilgliceroli (DAG), monoacilgliceroli (MAG), esteri del colesterolo ed esteri del retinile.
  Riferimenti correlati:
  PMID:15716583, PMID:15955102, PMID:19800417
• Esibisce una preferenza per i DAG rispetto ai TAG e ai MAG, e idrolizza preferenzialmente gli esteri di acidi grassi nella posizione sn-3 dello scheletro del glicerolo nei DAG.
  Riferimenti correlati:
  PMID:19800417
• L'HSL idrolizza anche il 2-arachidonoilglicerolo (un endocannabinoide) e l'etere 2-acetile monoalchilglicerolo, un precursore per la sintesi del fattore di attivazione delle piastrine.
• Nel tessuto adiposo e nel cuore, l'HSL mobilizza principalmente i trigliceridi immagazzinati in acidi grassi liberi, mentre nei tessuti steroideogenici, converte gli esteri del colesterolo in colesterolo libero per la produzione di ormoni steroidei.
• La proteina localizza alla membrana cellulare, alle caveole, al citosolo e alle gocce lipidiche, riflettendo i suoi ruoli dinamici nel metabolismo lipidico e nella segnalazione.
• L'HSL è soggetta a fosforilazione in più siti, inclusa Ser660, che regola la sua attività e la distribuzione subcellulare; è classificata come fosfoproteina.
• Il gene LIPE è sottoposto a splicing alternativo, producendo isoforme con distribuzioni tissutali distinte; il testicolo mostra un'espressione prominente.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è stato sviluppato contro un fosfopeptide sintetico corrispondente al sito di fosforilazione HSL Ser660. Per il rilevamento fosfo-specifico, considerare il trattamento dei campioni con inibitori delle fosfatasi durante la lisi e validare la specificità utilizzando il trattamento con fosfatasi.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda a ~117 kDa. Assicurarsi di un bloccaggio adeguato e della titolazione dell'anticorpo per minimizzare il legame non specifico in lisati di tessuti complessi.
• Nell'ELISA, utilizzare un fosfo-peptide come controllo positivo e un peptide non fosforilato per confermare la specificità dello stato di fosforilazione.
• È prevista la reattività crociata con HSL umana e murina; validare le prestazioni nel modello di specie pertinente prima degli studi quantitativi.

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