Anticorpo Monoclonale di Coniglio Anti-Fosfo-IκBα (Ser32) per WB, ELISA - P25963

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di IκBα

• L'inibitore alfa di NF-κB (IκBα) è un regolatore chiave dei fattori di trascrizione NF-κB, codificato dal gene NFKBIA. È anche noto come I-kappa-B-alfa, IkB-alfa e MAD3.
• IκBα funziona legandosi ai dimeri di NF-κB (come RELA/p65 e NFKB1/p50) nel citoplasma, mascherando i loro segnali di localizzazione nucleare e prevenendo la traslocazione nucleare. Riferimenti correlati: PMID:1493333, PMID:36651806, PMID:7479976
• In seguito a stimolazione pro-infiammatoria o immune, IκBα subisce fosforilazione nei residui di serina 32 e 36, portando all'ubiquitinazione e alla degradazione proteasomiale, rilasciando NF-κB per traslocare nel nucleo e attivare la trascrizione. Riferimenti correlati: PMID:7479976, PMID:7628694, PMID:7796813
• IκBα si localizza prevalentemente nel citoplasma ma può spostarsi nel nucleo, dove può anche inibire il legame di NF-κB al DNA o mediare la terminazione della risposta di NF-κB.
• La fosforilazione in Ser32 è un evento critico nella via canonica di segnalazione di NF-κB, rendendola un biomarcatore ampiamente studiato per l'attivazione della via.
• Le parole chiave di UniProt indicano che IκBα è una fosfoproteina, subisce ubiquitinazione ed è coinvolta nelle interazioni ospite-virus, sottolineando il suo ruolo centrale nella segnalazione immunitaria e nelle malattie.
• La proteina ha un peso molecolare di circa 35,6 kDa (calcolato) e contiene domini ripetuti di ankirina che mediano le interazioni con NF-κB.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico intorno a Ser32 di IκBα umano; pertanto, l'anticorpo riconosce specificamente la forma fosforilata. Includere sempre inibitori della fosfatasi durante la preparazione del campione per il Western blot per preservare il segnale di fosforilazione.
• Per applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o rilevamento per quantificare il fosfo-IκBα in lisati cellulari o tissutali; considerare l'abbinamento con un anticorpo per IκBα totale per la normalizzazione.
• Confermare la specificità dell'anticorpo nel proprio sistema trattando i campioni con fosfatasi lambda o utilizzando un peptide non fosforilato come competitore.
• È riportata una reattività incrociata per umano, topo e ratto. Convalidare le reattività nelle specie rilevanti prima di esperimenti su larga scala, poiché la conservazione dell'epitopo può variare.

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