Anticorpo policlonale coniglio anti-Fosfo-IκBα (Ser36) per WB e ELISA - P25963

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di IκBα (Inibitore alfa di NF-κB)

• IκBα (inibitore alfa di NF-κB), codificato dal gene NFKBIA, è un regolatore critico della via di segnalazione NF-κB, funzionando principalmente per trattenere i dimeri NF-κB nel citoplasma.
  Riferimenti correlati:
  PMID:1493333, PMID:36651806, PMID:7479976

• Upon stimulation by cytokines or pathogens, IκBα is phosphorylated at serine residues 32 and 36, which targets it for polyubiquitination and proteasomal degradation, allowing NF-κB nuclear translocation and gene activation.
  Riferimenti correlati:
  PMID:7479976, PMID:7628694, PMID:7796813

• La proteina contiene ripetizioni ankirina multiple che mediano la sua interazione con le subunità p65 e p50 di NF-κB, mascherando i loro segnali di localizzazione nucleare.

• IκBα viaggia tra il citoplasma e il nucleo; può entrare nel nucleo per rimuovere NF-κB dal DNA e sequestrarlo nuovamente nel citoplasma, garantendo risposte trascrizionali transitorie.

• Le modifiche post-traduzionali, inclusa la fosforilazione, l'ubiquitinazione, l'idrossilazione e la formazione di legami isopeptidici, regolano strettamente la stabilità e la funzione di IκBα.

• Le mutazioni in NFKBIA sono associate alla displasia ectodermica con immunodeficienza (EDA-ID), sottolineando il suo ruolo essenziale nello sviluppo e nell'omeostasi del sistema immunitario.

• I patogeni virali spesso prendono di mira IκBα per modulare la segnalazione NF-κB, evidenziando il suo coinvolgimento nelle interazioni ospite-virus.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo è stato prodotto contro un fosfopeptide sintetico corrispondente a Ser36 di IκBα umana; è probabile che rilevi specificamente IκBα solo quando fosforilata a questo residuo. Si consiglia la validazione della specificità fosfo utilizzando il trattamento con fosfatasi o la competizione con peptide non fosforilato.
• Per il Western blot, stimolare le cellule (es. con TNF-α o IL-1β) per indurre una robusta fosforilazione di IκBα. Potrebbe essere necessario un esperimento in serie temporale per catturare la natura transitoria di questa modifica.
• Sulla base della similarità di sequenza, si prevede che l'anticorpo cross-reatti con fosfo-IκBα di topo e ratto. Tuttavia, si consiglia di verificare l'allineamento della sequenza peptidica attorno a Ser36 in queste specie.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o rilevamento in un formato ELISA a sandwich. Ottimizzare empiricamente le condizioni di rivestimento e rilevamento.
• Evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento; conservare l'anticorpo a -20°C alla ricezione per mantenere l'attività.

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