Anticorpo policlonale coniglio anti-Fosfo-IRAK4 (Thr345/Ser346) per WB e ELISA - Q9NWZ3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della IRAK4

• IRAK4 (chinasi associata al recettore dell'interleuchina-1 4), nota anche come antigene del carcinoma renale NY-REN-64, è una chinasi proteina serina/treonina critica per le risposte immunitarie innate.
• Funziona nelle vie di segnalazione del recettore Toll-like (TLR) e del recettore IL-1 (IL-1R), reclutata rapidamente da MYD88 per formare il complesso Myddosome dopo l'attivazione del recettore. Riferimenti correlati: PMID:17878374
• IRAK4 fosforila IRAK1, stimolando la sua attività chinasica e autofosforilazione, e fosforila anche le ligasi E3 ubiquitina Pellino (PELI1-3) per promuovere la poliubiquitinazione di IRAK1, portando all'attivazione di NF-kB.
• In alternativa, IRAK4 fosforila TIRAP per promuovere la sua ubiquitinazione e degradazione, modulando la segnalazione.
• IRAK4 è localizzata nel citoplasma ed è una fosfoproteina; la fosforilazione ai residui Thr345 e Ser346 (mirata da questo anticorpo) è importante per la sua funzione chinasica.
• Le principali modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione e l'acetilazione; la proteina è anche soggetta a splicing alternativo.
• Le varianti della IRAK4 associate alle malattie sono collegate a immunodeficienze, sottolineando il suo ruolo nella difesa dell'ospite.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blotting, utilizzare un protocollo specifico per fosfo-proteine con tamponi di blocco appropriati e considerare cocktail di inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare la fosforilazione.
• Validare la specificità dell'anticorpo trattando i lisati con lambda fosfatasi; la scomparsa della banda conferma la specificità fosfo-specifica.
• Per l'ELISA, rivestire le piastre con l'immunogeno peptide fosforilato o lisati cellulari totali di cellule stimolate e ottimizzare le concentrazioni.
• Questo anticorpo è validato per campioni umani; la reattività crociata con altre specie deve essere testata indipendentemente.
• Dato che l'anticorpo è policlonale di coniglio, utilizzare un anticorpo secondario coniugato HRP anti-coniglio per il rilevamento.

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