Anticorpo Monoclonale di Coniglio Anti-Fosfo-JNK1-T183/Y185 + JNK2-T183/Y185 + JNK3-T221/Y223 per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P45983/P45984/P53779

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di JNK1/2/3

• Membro della famiglia delle chinasi attivate da mitogeni (MAPK), note anche come chinasi attivate dallo stress (SAPK), che include JNK1 (MAPK8), JNK2 (MAPK9) e JNK3 (MAPK10).
• Attivato da una doppia fosforilazione su un motivo Thr-Pro-Tyr (T183/Y185 in JNK1) da parte delle chinasi a monte MAP2K4/MKK4 e MAP2K7/MKK7 in risposta a stimoli di stress.
• Fosforila e regola fattori di trascrizione, in particolare c-Jun, ATF2 e ELK1, modulando così l'attività trascrizionale di AP-1. Riferimenti correlati: PMID:18307971
• Coinvolto nella proliferazione cellulare, differenziazione, apoptosi e autofagia, agendo su proteine chiave come p53/TP53, BAD, BCL2 e BECN1. Riferimenti correlati: PMID:21364637 PMID:21095239 PMID:18570871
• La localizzazione subcellulare include il citoplasma, il nucleo e le sinapsi; il trasferimento nel nucleo avviene in seguito all'attivazione.
• Contribuisce alla segnalazione infiammatoria fosforilando NLRP3, promuovendo l'assemblaggio dell'inflammasoma. Riferimenti correlati: PMID:28943315
• Regola il ritmo circadiano attraverso la fosforilazione dell'eterodimero CLOCK-BMAL1. Riferimenti correlati: PMID:22441692
• Lo splicing alternativo genera multiple isoforme (es. JNK1 alfa e beta) con preferenze di legame al substrato distinte.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Poiché questo anticorpo riconosce epitopi dipendenti dalla fosforilazione, trattare i campioni con inibitori delle fosfatasi durante la lisi ed evitare una conservazione prolungata a temperatura ambiente per preservare i segnali fosfo.
• Per il Western blot, aspettarsi bande a circa 48-52 kDa corrispondenti a JNK1/2; potrebbero essere osservate bande aggiuntive per JNK3 a pesi molecolari simili; utilizzare controlli positivi come cellule trattate con UV o anisomicina.
• Per l'immunoprecipitazione (IF-P), i passaggi di permeabilizzazione e bloccaggio sono critici; convalidare la colorazione in linee cellulari stimolate da stress pertinenti.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), considerare il recupero dell'antigene con buffer citrato (pH 6.0) e testare le diluizioni dell'anticorpo in tessuti noti per mostrare attivazione di JNK, come quelli in condizioni infiammatorie o apoptotiche.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; la reattività crociata con proteine JNK non fosforilate dovrebbe essere valutata utilizzando saggi di competizione con peptidi appropriati.

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