Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Fosfo-LIMK2-T505 per WB e IF/ICC - P53671

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di LIMK2

• LIMK2 è una serina/treonina-proteina chinasi che agisce a valle delle GTPasi della famiglia Rho, regolando la dinamica dei filamenti di actina e la motilità cellulare. Riferimenti correlati: PMID:10436159, PMID:11018042
• Fosforila TPPP per controllare l'organizzazione dei microtubuli astrali e l'orientamento del fuso mitotico durante la mitosi iniziale. Riferimenti correlati: PMID:22328514
• In vitro, LIMK2 fosforila la proteina basica della mielina e l'istone (MBP), dimostrando un'ampia attività su substrati. Riferimenti correlati: PMID:8537403
• LIMK2 sopprime la ciliogenesi fosforilando CFL1, interrompendo il traffico delle vescicole ciliari e guidando la repressione trascrizionale mediata da YAP1/TEAD4 di AURKA e PLK1. Riferimenti correlati: PMID:25849865
• La proteina contiene domini LIM e PDZ, suggerendo ruoli nelle interazioni proteina-proteina e nell'impalcatura molecolare.
• Si localizza nel citoplasma, nel citoscheletro (fuso e centrosoma), nel nucleo e nella regione perinucleare, in linea con le sue funzioni diversificate.
• Classificata come transferasi e fosfoproteina con motivi a dita di zinco leganti metalli, indicativi della sua complessità regolatoria.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per preservare la fosforilazione T505 durante la preparazione del campione, includere inibitori delle fosfatasi nei buffer di lisi ed evitare una manipolazione prolungata del campione.
• Per il Western blot, attendersi una banda a circa 72 kDa; utilizzare lisati freschi e validare i controlli di caricamento.
• Nell'immunofluorescenza, testare metodi di fissazione (es. metanolo vs paraformaldeide) per ottimizzare la ritenzione dell'epitopo fosforilato.
• Verificare la specificità utilizzando controlli trattati con fosfatasi o saggi di competizione con peptide per confermare il legame fosfo-specifico.
• L'anticorpo reagisce con campioni umani, di topo e di ratto; la reattività incrociata con altre specie dovrebbe essere testata empiricamente.
• Poiché l'anticorpo è prodotto in coniglio, selezionare un appropriato anticorpo secondario anti-coniglio per la rilevazione.

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