Anticorpo policlonale di coniglio Anti-Fosfo-LRP6 (S1490) per WB, ELISA - O75581

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di LRP6

• LRP6 (Low-density lipoprotein receptor-related protein 6, proteina 6 correlata al recettore delle lipoproteine a bassa densità) è un co-recettore transmembrana a passaggio singolo che, insieme a Frizzled (Fzd), forma il complesso Wnt-Fzd-LRP5-LRP6, che attiva la segnalazione della beta-catenina induttendo l'aggregazione in signalosomi di dimensioni comparabili a quelle dei ribosomi. Riferimenti correlati: PMID:11357136, PMID:11448771, PMID:15778503
• Dopo l'attivazione da parte di Wnt, il co-recettore Fzd/LRP6 recluta polimeri di DVL1 e il complesso AXIN1/GSK3B sulla membrana plasmatica, formando signalosomi che inibiscono la fosforilazione e la distruzione della beta-catenina mediata da AXIN1/GSK3. Riferimenti correlati: PMID:16513652
• LRP6 si localizza sulla membrana cellulare, nel reticolo endoplasmatico e nelle membrane raft, coerentemente con il suo ruolo nella ricezione e nel traffico del segnale.
• È ampiamente coespresso con LRP5 durante l'embriogenesi e nei tessuti adulti, riflettendo il suo ampio coinvolgimento nella segnalazione Wnt dello sviluppo e dell'omeostasi.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione su molteplici residui di serina/treonina (inclusa Ser1490), palmitoilazione e ubiquitinazione, che regolano l'attività e la stabilità del recettore.
• È caratterizzato da motivi strutturali come domini simili all'EGF e ripetizioni di classe A del recettore LDL, condivisi con altri membri della famiglia dei recettori LDL.
• LRP6 è riconosciuto come proteina variante associata a malattie; le mutazioni di LRP6 sono associate all'osteopetrosi e ad altre malattie scheletriche.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico corrispondente alla regione Ser1490 di LRP6 umano; per confermare la fosfo-specificità, si consiglia di trattare i lisati cellulari con lambda fosfatasi e confrontare i segnali, oppure eseguire saggi di competizione peptidica con peptidi non fosforilati e fosforilati.
• Per il Western blotting, LRP6 migra a circa 180 kDa; utilizzare percentuali di gel appropriate, tamponi di lisi adatti ai fosfoprotei e inibitori di proteasi/fosfatasi per preservare lo stato di fosforilazione.
• In ELISA, ottimizzare le condizioni di rivestimento e le diluizioni dell'anticorpo; l'abbinamento con un anticorpo di cattura può migliorare la sensibilità di rilevazione del fosfo-LRP6 endogeno nei sistemi di campione appropriati.
• A causa dell'omologia con LRP5 e altri membri della famiglia dei recettori LDL, si consiglia di eseguire test di reattività crociata nella matrice di campione prevista per confermare la specificità.

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