Anticorpo Monoclonale Anti-Fosfo-LRRK2-S935 di Coniglio per WB ed ELISA - Q5S007

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di LRRK2

• LRRK2 (Chinasi 2 serina/treonina-proteica a ripetizioni ricche di leucina), nota anche come Dardarin o PARK8, è una grande proteina multidominio di 286 kDa appartenente alla famiglia ROCO. Contiene ripetizioni ricche di leucina, un dominio Roc GTPasi, un dominio COR, un dominio chinasico e ripetizioni WD40.

• LRRK2 funziona come una chinasi serina/treonina e una GTPasi, fosforilando un'ampia gamma di substrati coinvolti nella plasticità neuronale, immunità innata, autofagia e traffico vescicolare. Riferimenti correlati: PMID:17114044 PMID:20949042 PMID:21850687

• È un regolatore chiave delle GTPasi RAB, fosforilando multiple proteine RAB (incluso RAB3, RAB8, RAB10, RAB12, RAB29, RAB35 e RAB43) per controllare la loro associazione alla membrana e le interazioni con gli effettori, modulando così il traffico vescicolare e la ciliogenesi. Riferimenti correlati: PMID:23395371 PMID:26824392 PMID:28720718

• LRRK2 regola positivamente l'autofagia attraverso una via calcio-dipendente CAMKK/AMPK, ed è reclutata sui lisosomi sovraccarichi dove fosforila RAB8A e RAB10 per promuovere il rilascio del contenuto lisosomiale. Riferimenti correlati: PMID:22012985 PMID:30209220 PMID:38227290

• Agisce come regolatore positivo dell'immunità innata mediando la fosforilazione di RIPK2 a valle di NOD1 e NOD2, potenziando così l'attivazione di RIPK2. Riferimenti correlati: PMID:27830463

• Si localizza in molteplici compartimenti cellulari inclusi vescicole citoplasmatiche, membrana dell'apparato di Golgi, reticolo endoplasmatico, endosomi, lisosomi, membrana mitocondriale esterna, vescicole sinaptiche e proiezioni cellulari come assoni e dendriti.

• Altamente espressa nel cervello, in particolare nei neuroni piramidali, nelle aree dopamino-cettive e nella substantia nigra pars compacta; è anche espressa in cuore, fegato, polmone, rene e cellule immunitarie come i neutrofili. Riferimenti correlati: PMID:29127255

• Le mutazioni in LRRK2 sono la causa genetica più comune del morbo di Parkinson familiare, con varianti patogene che si raggruppano nei domini GTPasi e chinasici.

Linee Guida Sperimentali e Consigli Tecnici

• Trattandosi di un anticorpo fosfo-specifico (anti-fosfo-S935), assicurarsi di includere inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare i segnali di fosforilazione.
• Per il WB, l'elevato peso molecolare (286 kDa) richiede condizioni di separazione adeguate; considerare l'uso di gel SDS-PAGE a bassa percentuale e tempi di trasferimento prolungati.
• Validare la specificità confrontando i segnali tra le forme fosforilate e non fosforilate; il blocco con il peptide immunizzante fosforilato può confermare la fosfo-specificità.
• È stata riportata reattività crociata con la LRRK2 di topo e ratto (probabilmente nel sito fosforilato equivalente); verificare l'omologia di sequenza dell'epitopo immunogeno in queste specie.
• Per l'ELISA, si possono utilizzare formati tipici diretti o sandwich; titolare la concentrazione dell'anticorpo nel sistema di campione rilevante.

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