Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-Fosfo-MAP2K4 (S257) per WB, IHC-P - P45985

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MAP2K4

• Chinasi MAP chinasi a doppia specificità 4 (MAP2K4), anche nota come JNKK1, MEK4, MKK4, SEK1, SKK1, SERK1, MAPKK4, PRKMK4, SAPKK1.
• Componente essenziale della via di segnalazione chinasi proteica attivata da stress/chinasi N-terminale c-Jun (SAP/JNK), che attiva direttamente JNK1, JNK2 e JNK3.
• Insieme a MAP2K7, MAP2K4 è una delle due sole chinasi che fosforilano e attivano direttamente le JNK; MAP2K4 fosforila preferenzialmente il residuo tirosina nel motivo Thr-Pro-Tyr, mentre MAP2K7 ha come bersaglio la treonina.
• Attiva anche le p38 MAPK (MAPK11, MAPK12, MAPK13, MAPK14), caratteristica che la distingue da MAP2K7 che attiva esclusivamente le JNK.
• Coinvolta nella segnalazione di morte mitocondriale, promuovendo il rilascio del citocromo c e l'apoptosi.
• La localizzazione subcellulare è principalmente citoplasmatica, con una certa presenza nel nucleo.
• Espressa ampiamente con una espressione particolarmente abbondante nel muscolo scheletrico.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione in S257 e in altri siti, l'acetilazione e la metilazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico intorno alla posizione S257; si prevede che l'anticorpo riconosca la MAP2K4 fosforilata in questo sito. Per il Western blot, ci si aspetta una banda a circa 44 kDa.
• Includere inibitori di fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare la fosforilazione. Convalidare la specificità usando competizione con peptide non fosforilato o trattamento con fosfatasi.
• Per IHC-P e IF/ICC, ottimizzare il recupero dell'antigene e prendere in considerazione l'uso di controlli di proteina totale e fosfo-specifici per confermare la localizzazione.
• La reattività crociata con topo e ratto consente l'applicazione in modelli roditori; convalidare l'anticorpo nel contesto del tessuto o della linea cellulare di interesse.
• Per ELISA e IP, si raccomandano esperimenti di titolazione per determinare le concentrazioni di lavoro ottimali.

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