Anticorpo policlonale coniglio Anti-Phospho-MAPKAPK2 (T334) per WB, ELISA - P49137

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di MAPKAPK2 (MK2)

• MAPKAPK2 è una chinasi serina/treonina attivata da stress che fosforila numerosi substrati coinvolti nella produzione di citochine, endocitosi, riorganizzazione del citoscheletro, migrazione cellulare, risposta al danno del DNA e regolazione trascrizionale.
• Media la fosforilazione di HSF1, promuovendone l'interazione con HSP90 e inibendo quindi l'omotrimerizzazione, il legame al DNA e la transattivazione di HSF1, modulando la risposta allo shock termico.
  Riferimenti correlati: PMID:16278218
• Nella segnalazione infiammatoria, MAPKAPK2 regola post-trascrizionalmente la produzione di TNF e IL6 fosforilando le proteine leganti gli elementi AU-rich (ARE) ELAVL1, HNRNPA0, PABPC1 e TTP/ZFP36, influenzando la stabilità e la traduzione dell'mRNA delle citochine.
• La chinasi partecipa alla via del danno del DNA: in seguito a stress genotossico si rilocalizza dal nucleo al citoplasma e fosforila HNRNPA0 e PARN, portando alla stabilizzazione dell'mRNA di GADD45A e contribuendo al checkpoint G2/M.
• In condizioni di stress indotto da UV, MAPKAPK2 fosforila CEP131, che aumenta il suo legame con le proteine 14-3-3 e inibisce la formazione di nuovi satelliti centriolari, collegando la chinasi alla biologia dei centrioli.
  Riferimenti correlati: PMID:26616734
• MAPKAPK2 è espresso ubiquitinariamente nei tessuti umani e si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo; la sua distribuzione subcellulare è fondamentale per la specificità funzionale.
• È classificato con parole chiave che includono legame all'ATP, chinasi, proteina chinasi serina/treonina, fosfoproteina e via di coniugazione Ubl, che riflettono i suoi ruoli regolatori.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Questo anticorpo riconosce specificamente la fosforilazione sulla treonina 334 (T334) di MAPKAPK2 umano. Per rilevare il segnale fosforilato, stimolare le cellule con induttori di stress (es. anisomicina, UV) e includere inibitori della fosfatasi nei tamponi di lisi.
• Per l'analisi Western blot, convalidare la specificità confrontando i segnali ottenuti con e senza trattamento con fosfatasi, oppure mediante competizione peptidica utilizzando il peptide immunogeno fosforilato rispetto a quello non fosforilato.
• Sebbene l'anticorpo sia raccomandato per WB e ELISA, gli utenti che lo utilizzano per altre applicazioni (es. IHC, IF) devono ottimizzare le condizioni e confermare la reattività crociata con la specie del proprio campione.
• Dato che la reattività crociata include uomo, topo e ratto, questo anticorpo può essere utilizzato nei comuni organismi modello; tuttavia, eseguire sempre controlli appropriati per confermare la reattività specie-specifica nel proprio sistema sperimentale.
• Per i saggi basati su ELISA, considerare di ottimizzare le concentrazioni di coating e gli anticorpi di rilevazione per ottenere il miglior rapporto segnale/rumore.
• Come per tutti gli anticorpi fosfo-specifici, ripetuti cicli di congelamento/scongelamento possono ridurre l'affinità; aliquotare e conservare a -20°C dopo il primo utilizzo.

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