Anticorpo policlonale di coniglio Anti-Fosfo-MARCKS-S158 per WB - P29966

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MARCKS

• Il substrato della C-chinasi ricco di alanina miristoilato (MARCKS) è un substrato principale della PKC che regola la dinamica del citoscheletro di actina, la motilità cellulare, l'adesione, la fagocitosi e l'esocitosi tramite il sequestro dei fosfolipidi di membrana (in particolare PIP2) e l'aggancio proteico (PubMed:23704996, PubMed:36009319). Riferimenti correlati: PMID:23704996, PMID:36009319
• Nelle cellule quiescenti, MARCKS sequestra PIP2 nelle zolle lipidiche, inibendo l'esocitosi; la fosforilazione da parte della PKC inverte questa regolazione, collegando la segnalazione chinasica al traffico di membrana (PubMed:23704996). Riferimenti correlati: PMID:23704996
• MARCKS promuove la migrazione delle cellule infiammatorie, l'adesione e la secrezione di citochine (es. TNF) nei macrofagi, e media la produzione di ROS indotta da batteri nei monociti (PubMed:37949888). Riferimenti correlati: PMID:37949888
• La proteina partecipa all'inizio dei neuriti, all'estensione e allo sviluppo dell'assone interagendo con CDC42 e la fusione di vescicole positive a RAB10 nel cono di crescita (per similarità).
• MARCKS viene rilevata negli spermatozoi è ampiamente espressa; la sua localizzazione subcellulare interessa la membrana plasmatica, il citoplasma e il citoscheletro, riflettendo uno shuttling intracellulare dinamico.
• Le modifiche post-traduzionali includono la miristoilazione N-terminale (ancoraggio alla membrana), la fosforilazione alla Serina 158 (bersaglio della PKC) e l'acetilazione, tutte critiche per la funzione e la localizzazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico corrispondente ai residui intorno alla Serina 158. Per WB, utilizzare la gestione standard delle proteine fosforilate: includere inibitori di fosfatasi nei buffer di lisazione ed evitare stripping e ripetizioni eccessive.
• Validare la specificità dell'anticorpo trattando i campioni con fosfatasi alcalina o utilizzando il blocco con peptide non fosforilato per confermare il segnale fosfo-dipendente.
• banda attesa: ~32 kDa, ma si noti che MARCKS può apparire più a causa delle modifiche post-traduzionali e della migrazione anomala.
• Per la reattività crociata tra specie, l'anticorpo è indicato per rilevare uomo, topo e ratto; verificare nel proprio sistema modello con controlli positivi appropriati (es. cellule stimolate da PKC).

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