pAb di coniglio anti-Phospho-MET-Y1234/1235 per WB, ELISA - P08581

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di MET

• MET, noto anche come recettore del fattore di crescita degli epatociti (HGFR), proto-oncogene c-Met e recettore del fattore di dispersione, è un recettore tirosina chinasi che trasduce i segnali dalla matrice extracellulare dopo il legame con il suo ligando HGF. Regola processi chiave come la proliferazione, la dispersione, la morfogenesi e la sopravvivenza.
• Dopo il legame con il ligando, MET subisce l'autofosforilazione sui residui di tirosina, inclusi Y1234 e Y1235 nel loop di attivazione, creando siti di attracco per effettori a valle come PI3K, PLCG1, SRC, GRB2, STAT3 e GAB1. Ciò innesca molteplici cascate: RAS-ERK (effetti morfogenetici), PI3K-AKT (pro-sopravvivenza) e vie PLCgamma-PKC.
• Durante lo sviluppo embrionale, la segnalazione di MET è essenziale per la gastrulazione, la migrazione dei precursori neuronali, l'angiogenesi, la formazione dei reni e lo sviluppo del muscolo scheletrico (migrazione dei progenitori muscolari e proliferazione secondaria dei mioblasti). Negli adulti, contribuisce alla guarigione delle ferite, alla rigenerazione degli organi, al rimodellamento dei tessuti e all'ematopoiesi.
• MET è localizzato principalmente sulla membrana cellulare, ma esiste anche una forma secreta. È espresso negli epatociti normali e nelle cellule epiteliali che rivestono lo stomaco, l'intestino tenue e crasso, nonché nei cheratinociti basali dell'esofago e della pelle. Un'elevata espressione si osserva nel fegato, nel tratto gastrointestinale, nella tiroide, nei reni e nel cervello, con livelli proteici rilevabili nell'osso metafisario. Riferimenti correlati: PMID:26637977
• La proteina funge da recettore per l'internalina InlB di Listeria monocytogenes, mediando l'ingresso batterico nelle cellule ospiti.
• MET è classificato come tirosina-proteina chinasi, glicoproteina e fosfoproteina, ed è associato a riarrangiamenti cromosomici legati a malattie. È anche soggetto a splicing alternativo e coniugazione con ubiquitina.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno utilizzato per questo anticorpo è un peptide fosforilato sintetico che abbraccia Y1234 e Y1235 di MET umano. Per WB ed ELISA, prendere in considerazione l'inclusione di una competizione con peptide non fosforilato o lisati trattati con fosfatasi per confermare la specificità della fosforilazione.
• Per WB, è prevista una banda a circa 156 kDa. Poiché MET è una proteina di membrana, utilizzare tamponi di lisi appropriati (ad es. RIPA) e includere inibitori di proteasi/fosfatasi. Per ELISA, convalidare l'anticorpo con fosfo-peptide rivestito e controlli appropriati.
• Stimolare le cellule con HGF prima della lisi può migliorare la rilevazione di MET fosforilato in questi siti. Prestare attenzione ai livelli di fosforilazione basale nella linea cellulare di interesse.
• Questo anticorpo è convalidato per campioni umani; la reattività crociata con altre specie non è stabilita.

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