Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-Fosfo-MKK3 (S189) + MKK6 (S207) per WB/IF/ELISA - P46734 / P52564

Specifiche Principali del Prodotto e Parametri

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di MKK3 e MKK6

• MKK3 (chinasi chinasi MAP 3), nota anche come MEK3 o SAPKK2, è codificata dal gene MAP2K3 e appartiene alla famiglia delle chinasi proteiche a doppia specificità. È strettamente correlata a MKK6 (codificata da MAP2K6), con entrambe le proteine che condividono un'alta omologia e funzionano come attivatori chiave delle chinasi MAP p38.
• Come chinasi a doppia specificità, MKK3 catalizza la fosforilazione concomitante dei residui treonina e tirosina nel loop di attivazione degli isoformi della chinasi MAP p38, un passaggio critico nella segnalazione responsiva allo stress.
• MKK3 è attivata da vari stress ambientali e citochine proinfiammatorie in vivo, collegando i segnali extracellulari alle risposte intracellulari come l'infiammazione, la differenziazione e l'apoptosi.
• Opera all'interno di una via di trasduzione del segnale iniziata dal recettore adrenergico ADRA1B, portando all'attivazione di MAPK14 (p38α), evidenziando il suo ruolo nella segnalazione dei recettori accoppiati a proteine G.
• A livello tissutale, MKK3 mostra un'espressione abbondante nel muscolo scheletrico ed è ampiamente espressa in altri tessuti, suggerendo un ampio coinvolgimento nella regolazione dello stress e del metabolismo.
• Le modifiche post-traduzionali di MKK3 includono acetilazione e fosforilazione; il residuo S189 è un sito critico di attivazione. La proteina subisce anche splicing alternativo producendo molteplici isoforme.
• MKK3 è associata a varianti di malattia e la sua disregolazione è stata implicata in condizioni patologiche, sottolineando la sua importanza come bersaglio terapeutico.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Poiché questo anticorpo riconosce la fosforilazione a S189 di MKK3 e S207 di MKK6, utilizzare inibitori delle fosfatasi durante la lisi cellulare e la preparazione del campione per preservare i segnali di fosforilazione.
• Per il Western blot, considerare il caricamento di controlli positivi trattati con induttori di stress (es. anisomicina, UV o shock osmotico) per verificare la reattività dell'anticorpo contro le forme attivate.
• Nell'immunofluorescenza, validare l'anticorpo in linee cellulari rilevanti in condizioni stimolate rispetto a non stimolate per confermare la localizzazione specifica del segnale fosfo.
• Possono essere osservate bande multiple corrispondenti a diversi isoformi e varianti di splicing (pesi molecolari riportati intorno a 36–39 kDa per MKK3 e 31–37 kDa per MKK6); consultare i pesi proteici specifici e assicurarsi di utilizzare appropriati marcatori di peso molecolare.

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