Anticorpo Monoclonale Anti-Fosfo-NF-kB p65/RelA (S536) per WB, IF/ICC, ELISA - Q04206

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NF-κB p65/RelA

• RELA codifica per il fattore di trascrizione p65 (noto anche come subunità nucleare p65 del fattore NF-kappa-B), una subunità centrale del complesso NF-κB.
• NF-κB è un fattore di trascrizione pleiotropico che controlla i geni nell'infiammazione, immunità, crescita cellulare, differenziazione, tumorigenesi e apoptosi, attivato da vari stimoli.
• p65 forma omodimeri o eterodimeri con altre proteine Rel; l'eterodimero RELA-NFKB1 è il più abbondante e attiva la trascrizione.
• Nelle cellule a riposo, NF-κB viene trattenuto nel citoplasma dagli inibitori IκB; dopo l'attivazione, IκB viene degradato, liberando NF-κB di translocare nel nucleo e legare il DNA.
• La fosforilazione alla serina 536 (S536) nel dominio di transattivazione potenzia l'attivazione trascrizionale e serve come marcatore dell'attivazione della via NF-κB.
• p65 si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma, spostandosi in risposta ai segnali.
• p65 subisce multiple modificazioni post-traduzionali (fosforilazione, acetilazione, metilazione, ubiquitinazione, S-nitrosilazione) che ne regolano la funzione.
• p65 è essenziale per l'espressione dei geni delle citochine nelle cellule T e regola la risposta agli interferoni durante l'infezione da SARS-CoV-2. Riferimenti correlati: PMID:15790681, PMID:33440148

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato attorno a S536; considerare l'uso di un controllo non-fosfopeptide per confermare la specificità fosfo-specifica nel proprio test.
• Per il western blot, è prevista una banda principale attorno ai 65 kDa; validare il rilevamento in lisati cellulari stimolati rispetto a quelli non stimolati per confermare la fosforilazione dipendente dall'attivazione.
• Per l'immunofluorescenza/ICC, includere un'adeguata permeabilizzazione e considerare la colorazione simultanea con un anticorpo p65 totale o un marcatore nucleare per visualizzare la translocazione.
• I protocolli ELISA possono utilizzare questo anticorpo per catturare la fosfo-p65; ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevamento per la matrice di campione specifica.

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