Anti-Fosfo-NFKB1-S337 Coniglio mAb per WB, ELISA - P19838

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NFKB1

• NFKB1 codifica la proteina precursore p105, che viene elaborata nella subunità attiva p50 del complesso del fattore di trascrizione NF-kappa-B. La forma p105 trattiene anche le proteine NF-kappa-B nel citoplasma. Riferimenti correlati: PMID:1423592
• Il complesso NF-kappa-B è un fattore di trascrizione pleiotropico presente in quasi tutti i tipi cellulari e regola i geni coinvolti nell'infiammazione, nell'immunità, nella differenziazione, nella crescita cellulare e nell'apoptosi.
• La subunità attiva p50 forma eterodimeri con RELA/p65 per creare il complesso p65-p50, un importante attivatore trascrizionale che si lega alla sequenza consenso kappa-B nei potenziatori dei geni bersaglio. Riferimenti correlati: PMID:1740106, PMID:7830764
• Gli omodimeri p50-p50 agiscono come repressori trascrizionali, ma possono diventare attivatori quando associati a BCL3.
• NFKB1/p105 reprime anche la segnalazione MAPK indotta da MAP3K8 finché la degradazione dipendente dal proteasoma non rilascia MAP3K8 attivo.
• La localizzazione subcellulare alterna tra citoplasma (inattivo, legato agli inibitori) e nucleo (attivo, dopo il rilascio da I-kappa-B).
• La fosforilazione alla serina 337 è una delle molteplici modifiche post-traduzionali che regolano l'attività, l'elaborazione o le interazioni di NFKB1; questo anticorpo riconosce specificamente la forma fosforilata in quel sito.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico attorno a S337; confermare la specificità utilizzando campioni trattati con fosfatasi o competendo con peptide non fosforilato.
• Per il Western blot, considerare l'utilizzo di campioni di cellule stimolate per attivare la segnalazione NF-kappa-B (es. con TNF-α) per osservare gli spostamenti delle bande specifiche per fosfo a 85kDa/105kDa.
• Il rilevamento ELISA può essere ottimizzato accoppiandolo con un anticorpo NFKB1 totale o utilizzando un rilevamento specifico per fosfo.
• Validare in linee cellulari o tessuti umani con nota attivazione di NF-kappa-B; la reattività crociata con altre specie non è garantita.
• Includere sempre controlli negativi e positivi appropriati per distinguere il segnale dipendente dalla fosforilazione.

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