Anticorpo policlonale coniglio anti-Fosfo-NFKB1 (S932) per WB - P19838

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NFKB1

• Il gene NFKB1 codifica per la proteina precursore p105, che viene successivamente elaborata per produrre la subunità attiva p50 (Fattore nucleare NF-kappa-B p50) (PubMed:1423592). Riferimenti correlati: PMID:1423592
• Il precursore p105 funge anche da proteina di ritenzione citoplasmatica per altri membri della famiglia NF-kB, sequestrandoli nel citoplasma finché non vengono ricevuti segnali di attivazione.
• La subunità p50 forma eterodimeri con RELA/p65 per costituire il complesso canonico NF-kB p65-p50, che si lega alla sequenza consenso kB 5'-GGRNNYYCC-3' e attiva la trascrizione dei geni bersaglio (PubMed:1740106, 7830764). Riferimenti correlati: PMID:1740106 PMID:7830764
• NF-kB è un fattore di trascrizione pleiotropico coinvolto nell'infiammazione, nella risposta immunitaria, nella proliferazione cellulare, nella differenziazione e nell'apoptosi, agendo come mediatore centrale della segnalazione indotta da stress e patogeni.
• Il complesso NF-kB inattivo viene trattenuto nel citoplasma dagli inibitori IkB; dopo stimolazione, IkB viene fosforilata dalle chinasi IKK e degradata, rilasciando NF-kB che transloca nel nucleo e regola l'espressione genica.
• NFKB1 è soggetto a estese modificazioni post-traduzionali, tra cui fosforilazione, acetilazione, ubiquitinazione e idrossilazione, che modulano la sua stabilità, l'attività di legame al DNA e la competenza trascrizionale.
• Localizzazione subcellulare: Presente sia nel citoplasma che nel nucleo, con il traffico tra questi compartimenti strettamente controllato da vie di segnalazione dipendenti dallo stimolo.
• Isoforme generate per splicing alternativo e molteplici membri della famiglia (RELA, RELB, REL, NFKB2) generano combinazioni di dimeri diverse con funzioni distinte, dall'attivazione alla repressione trascrizionale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico corrispondente ai residui circostanti Ser932 di NFKB1 umano; questo anticorpo è progettato per riconoscere NFKB1 solo quando è fosforilato in questo sito.
• Per il Western blot, includere inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare lo stato di fosforilazione e considerare il confronto tra lisati di cellule stimolate e non stimolate per confermare la specificità fosfo-specifica.
• Il peso molecolare previsto del precursore p105 è di ~105 kDa, mentre la subunità elaborata p50 migra a ~50 kDa; entrambe le bande possono essere rilevate a seconda delle condizioni del campione.
• Questo anticorpo è stato validato per Western blot su campioni umani, murini e di ratto; altre applicazioni non sono state testate e devono essere ottimizzate dall'utente finale.

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