Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Phospho-NPM1-T199 per WB, ELISA - P06748

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Nucleofosmina

• La nucleofosmina (NPM1, nota anche come B23, NO38, numatrina) è una fosfoproteina nucleolare essenziale per la biogenesi dei ribosomi, coordinando l'elaborazione dell'rRNA e l'esportazione nucleare dei ribosomi.
• Funge da chaperone per gli istoni core H3, H2B e H4, facilitando il corretto assemblaggio della cromatina e la formazione del nucleosoma.
• Regola la duplicazione del centrosoma e la replicazione del centriolo; la fosforilazione da parte di PLK2 innesca la replicazione del centriolo.
• Regola negativamente l'attivazione di EIF2AK2/PKR e sopprime l'apoptosi; antagonizza il blocco G2/M indotto da ATF5 per promuovere la proliferazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:22528486
• Interagisce con MYC per potenziare la trascrizione dei geni target di MYC, contribuendo potenzialmente all'oncogenesi. Riferimenti correlati: PMID:25956029
• Si localizza prevalentemente nel nucleolo, ma si trova anche nel nucleoplasma, citoplasma e centrosomi, riflettendo le sue molteplici funzioni cellulari.
• Soggetta a numerose modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione (es. Thr199), acetilazione, ADP-ribosilazione e ubiquitinazione, che ne modulano l'attività e il traffico subcellulare.
• Sovraespressione e mutazioni (es. dislocazione citoplasmatica) sono associate alla leucemia mieloide acuta e ad altri tumori, sottolineando il suo ruolo di proto-oncogene.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo fosfo-specifico è stato generato contro un peptide sintetico fosforilato in Thr199; per il WB, includere inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare la fosforilazione.
• Convalidare l'anticorpo nel vostro sistema sperimentale confrontando i segnali tra lisati non trattati e trattati con fosfatasi o utilizzando il blocco con peptide non fosforilato.
• Per l'ELISA, rivestire con il peptide fosforilato per valutarne la specificità e considerare test di reattività incrociata con NPM1 non fosforilata.
• Poiché la NPM1 si trasferisce nel citoplasma in determinate condizioni, la frazionamento cellulare o l'immunofluorescenza potrebbero integrare il rilevamento della distribuzione subcellulare della fosfo-NPM1.

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