Anticorpo Monoclonale di Coniglio Anti-Fosfo-NRF2-S40 per WB - Q16236

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NRF2

• NRF2 (Fattore nucleare eritroide 2 correlato 2), codificato da NFE2L2, è un fattore di trascrizione che regola le risposte cellulari allo stress ossidativo legandosi agli elementi di risposta antiossidante (ARE) nei promotori dei geni citoprotettivi.
  Riferimenti correlati: PMID:11035812 PMID:19489739 PMID:29018201
• In condizioni basali, i livelli di NRF2 sono mantenuti bassi tramite ubiquitinazione mediata da KEAP1 e degradazione proteasomiale nel citoplasma.
  Riferimenti correlati: PMID:11035812 PMID:15601839 PMID:29018201
• In seguito a stress ossidativo o sfida elettrofila, KEAP1 viene inibito, permettendo a NRF2 di traslocare nel nucleo, dimerizzare con piccole proteine Maf e attivare la trascrizione genica guidata da ARE.
  Riferimenti correlati: PMID:19489739 PMID:29590092
• NRF2 partecipa anche all'autofagia selettiva, dove l'interazione SQSTM1/p62-KEAP1 porta alla stabilizzazione di NFE2L2 e all'attivazione del pathway.
  Riferimenti correlati: PMID:20452972
• Oltre alla regolazione redox, NRF2 sopprime le risposte immunitarie innate e infiammatorie bloccando la trascrizione di citochine pro-infiammatorie e inibendo la dimerizzazione di IRF3, e limita la replicazione di virus tra cui SARS-CoV-2, HSV e virus Zika.
  Riferimenti correlati: PMID:30158636 PMID:33009401
• NRF2 è ampiamente espresso, con i livelli più alti nel muscolo adulto, rene, polmone, fegato e muscolo fetale. A livello subcellulare, si sposta tra il citoplasma e il nucleo.
• Le modificazioni post-traduzionali includono fosforilazione (es. a Ser-40), acetilazione, glicazione e ubiquitinazione, che ne modulano stabilità e attività.
• Lo splicing alternativo genera multiple isoforme di NRF2.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blotting, considerare l'uso di condizioni riducenti e caricare quantità proteiche appropriate da lisati cellulari trattati con induttori di stress ossidativo (es. H₂O₂) per rilevare la fosforilazione di NRF2 a Ser-40.
• Per IHC-P, validare la colorazione in tessuti positivi per NRF2 come fegato o rene, e includere il trattamento con inibitore della fosfatasi durante la preparazione del campione.
• È stata riportata reattività crociata con topo e ratto; verificare la dimensione attesa della banda (~68 kDa) nelle specie rilevanti.
• Nell'immunofluorescenza, monitorare la traslocazione nucleare dopo induzione di stress ossidativo.
• Per l'ELISA, utilizzare controlli con peptide fosforilato per confermare la specificità.

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