Anticorpo policlonale rabbit Anti-Fosfo-NRF2-S40 per WB, IF/ICC, ELISA - Q16236

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NRF2

• Identità proteica: NRF2 (Nuclear factor erythroid 2-related factor 2), codificato dal gene NFE2L2, è un fattore di trascrizione a leuchina zipper basico (bZIP) che appartiene alla famiglia cap 'n' collar (CNC).
• Regolazione della risposta antiossidante: NRF2 si lega agli elementi di risposta antiossidante (ARE) nei promotori dei geni citoprotettivi, inclusi gli enzimi detoxificanti di fase 2, per promuoverne l'espressione e neutralizzare gli elettrofili reattivi. Riferimenti correlati: PMID:11035812, PMID:19489739, PMID:29018201
• Degradazione mediata da KEAP1: In condizioni basali, NRF2 è indirizzato all'ubiquitinazione e alla degradazione proteasomiale da parte del complesso BCR(KEAP1), mantenendo bassi i suoi livelli citoplasmatici. Riferimenti correlati: PMID:11035812, PMID:15601839, PMID:29018201
• Attivazione per stress ossidativo: In caso di stress ossidativo, i metaboliti elettrofili inibiscono l'attività di KEAP1, permettendo a NRF2 di accumularsi e traslocare nel nucleo, dove eterodimerizza con le piccole proteine Maf e attiva la trascrizione. Riferimenti correlati: PMID:19489739, PMID:29590092
• Attivazione mediata dall'autofagia: L'autofagia selettiva innesca anche l'attivazione di NRF2 tramite l'inattivazione del complesso KEAP1 mediata da SQSTM1/p62, collegando l'autofagia all'omeostasi redox. Riferimenti correlati: PMID:20452972
• Immunità innata e difesa antivirale: NRF2 reprime la rilevazione del DNA citosolico antivirale sopprimendo l'espressione di STING1 e limita il rilascio di citochine proinfiammatorie durante le infezioni virali, incluso SARS-CoV-2, tramite l'inibizione di IRF3. Inibisce inoltre la replicazione di più virus in modo indipendente dall'interferone. Riferimenti correlati: PMID:30158636, PMID:33009401
• Localizzazione subcellulare e modifiche post-traduzionali: NRF2 si sposta tra citoplasma e nucleo. È soggetto a molteplici modifiche post-traduzionali, tra cui fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione, che controllano strettamente la sua stabilità e l'attività trascrizionale.
• Distribuzione tissutale: NRF2 è ampiamente espresso, con i livelli più alti rilevati nel muscolo adulto, rene, polmone, fegato e muscolo fetale.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico corrispondente ai residui attorno alla Ser40 di NRF2 umano. Per la rilevazione specifica della fosforilazione, conferma che l'epitopo sia esposto nel tuo sistema sperimentale; considera il trattamento dei campioni con inibitori della fosfatasi per preservare il segnale fosforilato.
• Durante l'esecuzione della Western blot, il peso molecolare previsto è ~68 kDa; verifica la specificità della banda utilizzando controlli positivi e negativi (ad esempio, cellule con stress ossidativo vs cellule non trattate o modelli di knockdown di KEAP1).
• Per IF/ICC, ottimizza le condizioni di fissazione e permeabilizzazione per mantenere l'integrità dell'epitopo fosforilato; come punto di partenza utilizza una fissazione con PFA al 4% e una permeabilizzazione con detergente delicato.
• Questo anticorpo è adatto per WB, IF/ICC e ELISA. Si consiglia di titolare l'anticorpo per ogni applicazione e di validarlo nei tipi di campioni umani rilevanti.

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