Anticorpo Monoclonale Anti-Fosfo-p38 MAPK (T180) per WB, IHC-P, ELISA - Q16539 / P53778 / Q15759

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di p38 MAPK (MAPK14)

• MAPK14 (p38 alfa) è una serina/treonina chinasi e un componente centrale della via di trasduzione del segnale delle MAP chinasi, che risponde a stimoli di stress e citochine proinfiammatorie; è uno dei quattro membri della famiglia delle p38 MAPK, con una stima di 200–300 substrati per chinasi.
• La chinasi attiva rapidamente chinasi a valle tra cui MAPKAPK2/MK2 e MAPKAPK3/MK3, che regolano l'espressione genica post-trascrizionale fosforilando proteine leganti l'mRNA come ZFP36 e ELAVL1, e modulando il fattore di allungamento della traduzione EEF2K.
  Riferimenti correlati:
  PMID:11154262
• Nel nucleo, p38 MAPK fosforila fattori di trascrizione (ATF1, ATF2, ATF6, ELK1, MEF2, p53, ecc.) e rimodellatori della cromatina, consentendo la rapida induzione di geni a risposta immediata e geni infiammatori; la fosforilazione dell'istone H3 (Ser‑10) da parte di MSK1/2 facilita il reclutamento di NF‑κB.
  Riferimenti correlati:
  PMID:9687510
  PMID:9792677
  PMID:10330143
  PMID:9430721
  PMID:9858528
• La chinasi si sposta tra citoplasma e nucleo ed è coinvolta in diversi processi cellulari: regola il turnover proteico (ad esempio la stabilità di CFLAR, la degradazione di EGLN3 mediata da SIAH2), l'autofagia (traffico di ATG9), l'endocitosi dei recettori (EGFR tramite effettori di RAB5A) e la rimozione dell'ectodominio (fosforilazione di ADAM17).
  Riferimenti correlati:
  PMID:17003045
  PMID:19893488
  PMID:16932740
  PMID:20188673
• MAPK14 subisce fosforilazione in corrispondenza di Thr‑180 e Tyr‑182 all'interno dell'anello di attivazione, un evento doppio essenziale per l'attività chinasica; come indicato nelle parole chiave di UniProt, le modifiche post-traduzionali aggiuntive includono acetilazione e ubiquitinazione.
• La proteina è ampiamente espressa, con i livelli più alti nel cervello, cuore, placenta, pancreas e muscolo scheletrico; si osserva una espressione più bassa in polmone, fegato e rene.
• Lo splicing alternativo genera isoforme come MXI2 (responsivo ai mitogeni e allo stress ossidativo) e EXIP (implicato nell'insorgenza precoce dell'apoptosi) che presentano preferenze di substrato e output di segnalazione differenti.
• In risposta al danno del DNA, MAPK14 fosforila CDC25B/C determinando l'arresto in fase G2, e TIAR per stabilizzare l'mRNA di GADD45A; attiva anche l'inflammasoma NLRP1 dopo esposizione a UV‑B o collisioni ribosomiali.
  Riferimenti correlati:
  PMID:11333986
  PMID:20932473
  PMID:35857590

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide fosforilato intorno a Thr‑180; pertanto l'anticorpo rileva principalmente p38 MAPK attivata (fosforilata). Per la verifica, considerare il trattamento dei campioni con λ-fosfatasi o l'uso di lisati di controllo non stimolati per confermare la fosfo-specificità nel Western blot.
• Per l'immunistochimica (IHC‑P), il recupero dell'antigene a microonde o in pentola a pressione può migliorare la rilevazione dei fosfo-epitopi; convalidare la specificità della colorazione preincubando l'anticorpo con il peptide fosforilato immunogeno.
• Nelle applicazioni ELISA l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione per quantificare p38 attivata nei lisati cellulari; se possibile, includere la proteina p38 fosforilata ricombinante come controllo per la curva di calibrazione.
• Quando si analizzano più isoforme di p38, tenere presente che questo anticorpo probabilmente reagisce in modo crociato con p38 beta (MAPK11) e gamma (MAPK13) a causa dell'elevata omologia di sequenza intorno a Thr‑180; convalidare la specificità per l'isoforma nel sistema di campionamento in uso.

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