Anticorpo monoclonale coniglio anti-Phospho-p38 MAPK (T180/Y182) per WB e ELISA - Q15759 / P53778 / O15264 / Q16539

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Phospho-p38 MAPK (T180/Y182)

• La proteina chinasi 11 attivata da mitogeni (MAPK11), nota anche come p38 beta, è una serina/treonina chinasi e una componente essenziale della via di trasduzione del segnale MAP chinasi, che risponde a stimoli extracellulari come citochine proinfiammatorie o stress (PubMed:12452429, PubMed:20626350, PubMed:35857590). Riferimenti correlati: PMID:12452429, PMID:20626350, PMID:35857590
• Appartiene alla famiglia p38 MAPK, che comprende quattro isoforme: p38 alfa (MAPK14), p38 beta (MAPK11), p38 gamma (MAPK12) e p38 delta (MAPK13). Le loro funzioni sono ampiamente ridondanti con MAPK14.
• Le p38 MAPK fosforilano un'ampia gamma di substrati (stimati tra 200 e 300 per ciascuna), tra cui chinasi a valle come MAPKAPK2/MK2 e MAPKAPK3/MK3, che regolano l'espressione genica a livello post-trascrizionale, e RPS6KA5/MSK1 e RPS6KA4/MSK2, che attivano direttamente i fattori di trascrizione e fosforilano l'istone H3 (PubMed:9687510). Riferimenti correlati: PMID:9687510
• I substrati chiave includono fattori di trascrizione (ATF1, ATF2, ATF6, ELK1, p53, MEF2C) (PubMed:10330143, PubMed:15356147, PubMed:9430721), modificatori della cromatina (DOT1L) (PubMed:38270553), e proteine coinvolte nella stabilità dell'mRNA (ZFP36), nella traduzione (EIF4E2 tramite MKNK1/2) (PubMed:11154262) e nel turnover proteico (CFLAR, ADAM17). Riferimenti correlati: PMID:10330143, PMID:15356147, PMID:9430721, PMID:38270553, PMID:11154262
• Nel nucleo, la fosforilazione dipendente da p38 MAPK dell'istone H3 sulla Serina-10 (H3S10ph) aumenta l'accessibilità dei siti di legame di NF-kappa-B, promuovendo l'espressione di geni infiammatori.
• MAPK11 è localizzato sia nel citoplasma che nel nucleo, è espresso ai livelli più alti nel cervello e nel cuore, con espressione aggiuntiva nella placenta, nei polmoni, nel fegato, nel muscolo scheletrico, nei reni e nel pancreas.
• La fosforilazione a T180 e Y182 all'interno dell'ansa di attivazione (motivo TxY) è richiesta per l'attivazione della chinasi. Questo anticorpo riconosce specificamente la forma attiva doppiamente fosforilata.
• Parole chiave: Legame ATP, chinasi, risposta allo stress, regolazione della trascrizione, fosfoproteina.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato intorno a T180/Y182 della MAPK umana; pertanto, è previsto che l'anticorpo rilevi le isoforme fosforilate di p38 MAPK. Per il WB, consigliamo di utilizzare inibitori di fosfatasi nei buffer di lisì per preservare gli stati di fosforilazione.
• Validare l'anticorpo in linee cellulari o tessuti stimolati con attivatori noti di p38 (ad esempio anisomicina, TNF-alfa o stress osmotico) per confermare la specificità. Utilizzare controlli positivi e negativi appropriati.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; standardizzare con peptide fosforilato o lisati cellulari stimolati.
• È stata osservata reattività incrociata con topo e ratto, ma le prestazioni devono essere verificate nei sistemi di campioni pertinenti a causa di potenziali differenze specifiche per specie.
• Come anticorpo monoclonale di coniglio, offre elevata specificità e coerenza lotto dopo lotto; seguire i protocolli standard per risultati ottimali.

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