Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-Fosfo-p38 MAPK (Y182) per WB, IF/ICC, ELISA - Q16539

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di p38 MAPK (MAPK14)

• MAPK14 è una chinasi serina/treonina che funge da componente essenziale della via di trasduzione del segnale delle chinasi MAP, mediando le risposte cellulari agli stimoli extracellulari come le citochine pro-infiammatorie e lo stress fisico.
• Fosforila e attiva i fattori di trascrizione (es. CREB1, ATF1, RELA, STAT1, STAT3) e l'istona H3 tramite le chinasi a valle MSK1 e MSK2, inducendo così geni a risposta immediata in risposta a stress o stimoli mitogenici. Riferimenti correlati: PMID:9687510 PMID:9792677
• MAPK14 regola la sintesi proteica attivando MKNK1/MNK1 e MKNK2/MNK2, i quali fosforilano il fattore di iniziazione EIF4E2. Riferimenti correlati: PMID:11154262
• Modula il ricambio proteico attraverso la fosforilazione della ligasi dell'ubiquitina SIAH2, controllando la degradazione di EGLN3, e interferisce anche con l'autofagia influenzando il traffico di ATG9. Riferimenti correlati: PMID:17003045 PMID:19893488
• Nel citoplasma, la via p38 MAPK è un importante regolatore dell'endocitosi; ad esempio, l'internalizzazione dell'EGFR mediata dalla clatrina e indotta da citochine infiammatorie e radiazioni UV dipende dalla fosforilazione mediata da MAPK14 dell'EGFR e degli effettori RAB5A. Riferimenti correlati: PMID:16932740
• MAPK14 fosforila ADAM17, promuovendo lo shedding del ectodominio dei ligandi della famiglia TGF-alpha e la successiva attivazione della segnalazione EGFR. Riferimenti correlati: PMID:20188673
• La chinasi fosforila CDC25B e CDC25C, portando a un ritardo in G2 dopo la radiazione ultravioletta attraverso il legame con le proteine 14-3-3. Riferimenti correlati: PMID:11333986
• MAPK14 si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo ed è espresso nel cervello, cuore, placenta, pancreas e muscolo scheletrico, con livelli inferiori nel polmone, fegato e rene. Le isoforme MXI2 ed EXIP mostrano specificità di attivazione e substrato distinte.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'anticorpo è stato sviluppato contro un fosfopeptide sintetico corrispondente al sito di fosforilazione Y182. Per confermare la fosfo-specificità, considerare il trattamento dei campioni con λ-fosfatasi o l'uso di un peptide non fosforilato come controllo di blocco in esperimenti paralleli.
• Per il Western blotting, utilizzare controlli positivi come lisati cellulari da colture stimolate con induttori di stress (es. anisomicina, radiazioni UV o citochine pro-infiammatorie) per indurre una robusta fosforilazione Y182 di p38 MAPK.
• Quando si esegue l'immunofluorescenza, ottimizzare attentamente le condizioni di fissaggio e permeabilizzazione, poiché trattamenti troppo severi possono compromettere l'epitopo fosforilato. L'inclusione di un cocktail di inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione può aiutare a preservare il segnale di fosforilazione.
• L'anticorpo è qualificato per WB, IF/ICC ed ELISA. Per altre applicazioni, si raccomanda un'ulteriore validazione nel sistema di campione pertinente.

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