Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Fosfo-p38 MAPK (Y182) per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16539

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Mitogen-activated Protein Kinase 14 (MAPK14/p38α)

• MAPK14, anche nota come p38α, è una serina/treonina chinasi centrale nella via di trasduzione del segnale delle MAP chinasi, attivata da citochine pro-infiammatorie, stress fisico e patogeni. Fosforila numerosi fattori di trascrizione (ATF1, ATF2, ATF6, ELK1, TP53, MEF2C, MEF2A) e chinasi a valle (MAPKAPK2/MK2, MAPKAPK3/MK3, RPS6KA5/MSK1, RPS6KA4/MSK2) per orchestrare le risposte cellulari (PubMed:9687510, PubMed:9792677, PubMed:10330143, PubMed:9430721, PubMed:9858528). Riferimenti correlati: PMID:9687510 PMID:9792677 PMID:10330143 PMID:9430721 PMID:9858528

• L'attivazione delle chinasi a valle da parte di MAPK14 porta al rimodellamento della cromatina e all'induzione di geni a risposta immediata (tramite fosforilazione dell'istone H3 mediata da MSK1/MSK2) nonché a regolazione post-trascrizionale attraverso la fosforilazione dipendente da MK2/MK3 di ZFP36 e ELAVL1 (PubMed:9687510, PubMed:9792677, PubMed:11154262). Riferimenti correlati: PMID:9687510 PMID:9792677 PMID:11154262

• MAPK14 controlla anche il turnover proteico (tramite la ligasi dell'ubiquitina SIAH2, PubMed:17003045), l'autofagia (attraverso ATG9, PubMed:19893488), l'endocitosi mediata dalla clatrina (modulando gli effettori di RAB5A, PubMed:16932740) e il distacco dell'ectodominio (tramite fosforilazione di ADAM17, PubMed:20188673). Riferimenti correlati: PMID:17003045 PMID:19893488 PMID:16932740 PMID:20188673

• Questa chinasi è essenziale per lo sviluppo vascolare placentare nella metà della gestazione e per l'eritropoiesi indotta da stress tramite regolazione di EPO (PubMed:10943842), e promuove la piroptosi associata all'inflammasoma NLRP1 in seguito a collisioni ribosomiali (PubMed:35857590). Riferimenti correlati: PMID:10943842 PMID:35857590

• Gli isoformi MXI2 ed EXIP mostrano diversità funzionale: MXI2 è attivato da mitogeni e stress ossidativo ma fosforila scarsamente ELK1 e ATF2, mentre EXIP potrebbe facilitare l'apoptosi precoce.

• La localizzazione subcellulare è prevalentemente citoplasmatica e nucleare. MAPK14 è espressa ad alti livelli nel cervello, cuore, placenta, pancreas e muscolo scheletrico, con livelli inferiori in polmone, fegato e rene.

• La fosforilazione in Tyr-182 (Y182) è un marcatore critico di attivazione; l'anticorpo riconosce specificamente questo fosfo-epitopo, rendendolo uno strumento prezioso per studiare le cascate di segnalazione dello stress e dell'infiammazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo monoclonale di coniglio fosfo-specifico è stato generato utilizzando un peptide sintetico fosforilato corrispondente alla regione intorno a Tyr-182 di MAPK14 umana. È previsto che rilevi selettivamente la forma fosforilata (attiva) di p38 MAPK nelle applicazioni WB, IHC-P, IF/ICC ed ELISA.
• Per il Western blotting, la proteina bersaglio ha un peso molecolare previsto di circa 41 kDa; si consiglia di utilizzare lisati di cellule/tessuti stimolati o trattati in cui la fosforilazione di p38 MAPK è indotta per migliorare il rilevamento del segnale.
• Nell'immunoistochimica e nell'immunofluorescenza, potrebbero essere necessari metodi di recupero dell'antigene e un attento controllo dell'attività della fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare il fosfo-epitopo. Includere cocktail di inibitori delle fosfatasi nei buffer di lisi e validare il segnale con controlli di trattamento con fosfatasi.
• È stata osservata reattività incrociata con campioni umani, di topo e di ratto; si raccomanda l'ottimizzazione della diluizione dell'anticorpo e delle condizioni di blocco per ciascuna applicazione e specie per ottenere un rapporto segnale/rumore ottimale.

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