Anticorpo policlonale coniglio anti-Fosfo-p38 MAPK (Y182) per WB, IHC-P, ELISA - Q16539

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di p38 MAPK (MAPK14)

• MAPK14 (noto anche come p38 alfa) è una chinasi serina/treonina appartenente alla famiglia p38 MAPK, che include quattro isoforme: p38 alfa, beta, gamma e delta. È attivata dalla doppia fosforilazione su Thr180 e Tyr182 in risposta a segnali di stress e infiammatori.
• La funzione primaria di MAPK14 è transdurre gli stimoli extracellulari in risposte intracellulari, regolando l'espressione genica, il ciclo cellulare, l'apoptosi e l'autofagia. Fosforila un vasto insieme di substrati, inclusi fattori di trascrizione e altre chinasi.
• I bersagli a valle includono le chinasi MSK1 e MSK2, che fosforilano direttamente fattori di trascrizione come CREB1 e STAT1, e fosforilano anche l'istone H3 per facilitare il rimodellamento della cromatina nei geni a risposta immediata. Riferimenti correlati: PMID:9687510, PMID:9792677
• MAPK14 attiva anche MK2 e MK3, che controllano l'espressione genica post-trascrizionale fosforilando proteine leganti l'mRNA come ZFP36 (tristetraprolina) ed ELAVL1, regolando così la stabilità e la traduzione dell'mRNA.
• Nel nucleo, MAPK14 fosforila direttamente i fattori di trascrizione ATF1, ATF2 e p53/TP53 per modulare i programmi genici responsivi allo stress. Riferimenti correlati: PMID:10330143, PMID:9430721, PMID:9858528
• MAPK14 è coinvolta nel controllo del ciclo cellulare; fosforila CDC25B e CDC25C, promuovendo il loro legame alle proteine 14-3-3 e innescando un ritardo G2/M dopo l'irradiazione UV. Riferimenti correlati: PMID:11333986
• Durante l'infezione microbica, MAPK14 viene fosforilata nei linfociti T da EsxA di Mycobacterium tuberculosis, portando all'inibizione della produzione di IFN-gamma. Riferimenti correlati: PMID:21586573
• A livello subcellulare, MAPK14 si trova sia nel citoplasma che nel nucleo. È ampiamente espressa, con livelli più elevati nel cervello, cuore, placenta, pancreas e muscolo scheletrico, e livelli inferiori nel polmone, fegato e rene. Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato su Y182, garantendo la specificità per la forma attivata della p38 MAPK. Quando si generano anticorpi personalizzati specifici per fosfo, considerare l'utilizzo di un design simile con un fosfopeptide e una matrice di affinità non fosforilata per arricchire i cloni specifici per fosfo.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda a circa 41 kDa. Includere inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare la fosforilazione. Validare la specificità utilizzando lisati trattati con fosfatasi.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), ottimizzare il recupero dell'antigene e utilizzare controlli appropriati specifici per fosfo. È indicata la reattività incrociata con umano, mouse e ratto, ma si consiglia la validazione nel sistema di campione pertinente.
• Nell'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per il rilevamento della p38 MAPK fosforilata in lisati cellulari o tissutali. Assicurarsi di un bloccaggio adeguato per minimizzare il rumore di fondo.

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