Anticorpo policlonale coniglio anti-Fosfo-p53 (S33) per WB, IHC-P, IP, ELISA - P04637

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della p53

• Codificata dal gene TP53, l'antigene tumorale cellulare p53 è un fattore di trascrizione multifunzionale che agisce come un potente soppressore tumorale regolando l'arresto del ciclo cellulare, la riparazione del DNA e l'apoptosi in risposta a vari stress cellulari. Riferimenti correlati: PMID:11025664 PMID:12524540 PMID:12810724

• La p53 esercita le sue funzioni pro-apoptotiche sia attraverso l'attivazione trascrizionale (es. BAX e FAS) che la repressione (es. Bcl-2), con la sua attività modulata dalle interazioni con le proteine della famiglia ASPP. Riferimenti correlati: PMID:12524540 PMID:17189187

• Oltre alla trascrizione nucleare, la p53 si localizza anche nel citoplasma, nei mitocondri, nel reticolo endoplasmatico e nei centrioli, riflettendo il suo coinvolgimento nell'apoptosi e nella necrosi non trascrizionali.

• La p53 è espressa ubiquitariamente nei tessuti umani normali, con diversi isoforme alternativi che mostrano pattern di espressione dipendenti dal tessuto.

• Le principali modificazioni post-traduzionali includono la fosforilazione, l'acetilazione, la metilazione e l'ubiquitinazione, che regolano strettamente la stabilità della p53, la localizzazione subcellulare e l'attività trascrizionale.

• La p53 contribuisce alla regolazione dell'orologio circadiano reprimendo l'attivazione trascrizionale mediata da CLOCK-BMAL1 di PER2. Riferimenti correlati: PMID:24051492

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico corrispondente ai residui circostanti il Ser33 della p53 umana. Per validare la specificità fosfo, considerare l'utilizzo di campioni trattati con lambda fosfatasi o la competizione con non-fosfopeptide in parallelo.
• Per il western blot (WB), la dimensione della banda prevista è di ~53 kDa (p53 canonica) o 44 kDa (alcuni isoforme); le bande possono spostarsi leggermente a causa della fosforilazione e di altre modificazioni.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), le condizioni di recupero dell'antigene e la fissazione del tessuto possono influenzare il rilevamento dell'epitopo fosforilato; ottimizzare utilizzando controlli positivi noti come tessuti irradiati o trattati con stress genotossico.
• Quando si esegue l'immunoprecipitazione (IP) o l'ELISA, includere appropriati controlli IgG e considerare l'abbinamento con un anticorpo p53 totale per valutare la stechiometria della fosforilazione.
• Questo anticorpo cross-reagisce con la p53 di topo e ratto, rendendolo adatto per studi traslazionali; tuttavia, confermare sempre la reattività crociata nel vostro specifico sistema modello.

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