Anticorpo policlonale coniglio anti-Fosfo-p70 S6 Chinasi 1-S371 per WB e ELISA - P23443

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della p70 S6 Chinasi 1

• RPS6KB1 (p70 S6 chinasi 1) è una serina/treonina chinasi che agisce a valle della segnalazione mTORC1 in risposta a fattori di crescita e nutrienti, promuovendo la proliferazione cellulare, la crescita e la progressione del ciclo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:11500364 PMID:12801526 PMID:14673156
• Regola la traduzione dipendente dal cappuccio fosforilando EIF4B, RPS6 e inibendo EEF2K, attivando così EEF2, nonché promuovendo la traduzione pionieristica tramite POLDIP3/SKAR. Riferimenti correlati: PMID:11500364 PMID:12801526 PMID:14673156 PMID:15341740
• In condizioni di carenza di nutrienti, RPS6KB1 inattiva si lega al complesso EIF3; dopo stimolazione mitogena, la fosforilazione da parte di mTORC1 causa dissociazione e attivazione. Riferimenti correlati: PMID:16286006
• La chinasi media la sopravvivenza cellulare fosforilando il fattore pro-apoptotico BAD (per somiglianza) e fosforilando l'URI1 mitocondriale per rilasciare PP1CC, che defosforila RPS6KB1 a Thr-412 in un ciclo di feedback negativo. Riferimenti correlati: PMID:17936702
• RPS6KB1 partecipa all'inibizione di feedback della segnalazione mTORC2/AKT fosforilando SIN1, MTOR, RICTOR e DEPTOR. Riferimenti correlati: PMID:15899889 PMID:19720745 PMID:19935711 PMID:22017876
• Contribuisce alla resistenza all'insulina indotta da TNF fosforilando IRS1 su residui di serina, portando alla degradazione di IRS1. Riferimenti correlati: PMID:18952604
• La chinasi fosforila e attiva CAD, un enzima chiave nella biosintesi delle pirimidine, ed EPRS per promuovere l'assorbimento di acidi grassi negli adipociti. Riferimenti correlati: PMID:23429703 PMID:28178239
• A livello subcellulare, RPS6KB1 si localizza nel citoplasma, nel nucleo, nella membrana esterna dei mitocondri e nella sinapsi, riflettendo i suoi diversi ruoli di segnalazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico corrispondente alla Ser371 di RPS6KB1 umano; si consiglia di validare la specificità dell'anticorpo per la forma fosforilata utilizzando lisati trattati con fosfatasi o peptide non fosforilato competitivo.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 59 kDa (anche se potrebbe migrare intorno a 70 kDa a causa della fosforilazione). Includere inibitori delle proteasi e delle fosfatasi durante la preparazione del campione.
• Per l'ELISA, considerare l'uso del peptide fosforilato come controllo positivo e del peptide non fosforilato per valutare la specificità fosfo-specifica.
• Validare indipendentemente la reattività incrociata nei campioni di topo; le sequenze umana e murina sono altamente conservate attorno a Ser371.
• L'ottimizzazione della diluizione dell'anticorpo e delle condizioni di blocco potrebbe essere necessaria per diverse impostazioni sperimentali.

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