Anticorpo Monoclonale di Coniglio Anti-Fosfo-p90Rsk/RSK1/RPS6KA1 (S380) per WB, ELISA - Q15418

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RPS6KA1 (RSK1)

• RPS6KA1 (RSK1) è una serina/treonina chinasi della famiglia delle chinasi p90 della proteina ribosomiale S6, nota anche come p90RSK1, MAPKAPK1 e RSK1, codificata dal gene RPS6KA1; lo splicing alternativo genera multiple isoforme.
• Agisce a valle della segnalazione ERK1/2 (MAPK3/MAPK1) per mediare l'attivazione mitogenica e indotta da stress dei fattori di trascrizione CREB1, ETV1/ER81 e NR4A1/NUR77, accoppiando così la cascata MAPK alla regolazione trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:10679322 | PMID:12213813 | PMID:15117958
• Regola la traduzione cap-dipendente fosforilando la proteina ribosomiale S6 (RPS6) tramite un meccanismo indipendente da mTOR e il fattore di inizio della traduzione eucariotico 4B (EIF4B), aumentandone l'affinità per il complesso EIF3. Riferimenti correlati: PMID:17360704 | PMID:16763566
• Modula la segnalazione mTOR fosforilando direttamente TSC2 in Ser1798 (inibendone l'attività GAP) e fosforilando RPTOR e DEPTOR, influenzando così le attività di mTORC1 e mTORC2. Riferimenti correlati: PMID:15342917 | PMID:22017876
• Promuove la sopravvivenza cellulare fosforilando e inattivando i fattori pro-apoptotici BAD e DAPK1, e supporta la sopravvivenza delle cellule stellate epatiche attraverso la fosforilazione di CEBPB. Riferimenti correlati: PMID:10679322 | PMID:16213824 | PMID:11684016
• Regola la progressione del ciclo cellulare fosforilando CDKN1B (p27Kip1), promuovendone il legame con 14-3-3 e la ritenzione citoplasmatica, e controlla la migrazione cellulare tramite la fosforilazione di EPHA2 in Ser897. Riferimenti correlati: PMID:18508509 | PMID:18813292 | PMID:26158630
• Si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma, consentendo funzioni duali nella regolazione trascrizionale e nella segnalazione citoplasmatica.
• Contiene due domini chinasi non identici, richiede ATP e magnesio per l'attività, ed è regolata da molteplici eventi di fosforilazione, incluso Ser380 nella regione linker che è critica per l'attivazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un fosfo-peptide sintetico intorno a Ser380 di RSK1 umano; considerare l'uso del trattamento con fosfatasi lambda o mutanti non fosforilabili in Ser380 in WB per confermare la specificità fosfo.
• Per il WB, il peso molecolare previsto è ~83 kDa; utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati e validare con controlli positivi noti (es. cellule stimolate con EGF) a causa degli spostamenti di mobilità dipendenti dalla fosforilazione di RSK1.
• In ELISA, ottimizzare le condizioni di rivestimento (pH, concentrazione del peptide) per mantenere l'integrità dell'epitopo fosfo, e includere controlli con peptide non fosforilato per garantire la specificità.
• Reagisce in modo incrociato con RSK1 di topo e ratto; verificare l'omologia di sequenza intorno al sito fosfo per queste specie per anticipare il rilevamento.

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