Anticorpo monoclonale di coniglio anti-PI3 Chinasi p55-gamma fosforilata (PIK3R3) per WB, IF/ICC, ELISA - Q92569

Specifiche e parametri principali del prodotto

Informazioni biologiche: Funzione e localizzazione della subunità regolatoria gamma della PI3 Chinasi (PIK3R3)

• Codificata dal gene PIK3R3, la subunità regolatoria gamma della PI3 chinasi (conosciuta anche come p55PIK o p55-gamma) è una subunità regolatoria da 55 kDa delle fosfatidilinositolo 3-chinasi di classe IA, caratterizzata dal dominio SH2.
• Si lega alle protein-tirosin chinasi attivate (fosforilate) tramite il suo dominio SH2, modulandone l'attività chinasica; durante la stimolazione insulinica si associa anche a IRS-1 per propagare i segnali a valle.
• Appartiene alla famiglia delle subunità regolatorie della PI3K che include le isoforme p85 e p55, contribuendo alla diversità dei complessi di segnalazione della PI3K.
• Presenta la massima espressione nel cervello e nei testicoli, con livelli più bassi nel tessuto adiposo, rene, cuore, polmone e muscolo scheletrico, suggerendo ruoli regolatori specifici per tessuto.
• Classificata come fosfoproteina soggetta a splicing alternativo, è stata identificata in studi di proteomica ad alto rendimento, evidenziando la sua regolazione post-traduzionale e l'inclusione nei dataset di riferimento.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico corrispondente a Y199, quindi l'anticorpo riconosce specificamente la forma fosforilata; includere inibitori della fosfatasi durante la preparazione dei campioni per preservare il segnale di fosforilazione.
• Per Western blotting, convalidare la banda rilevata a ~55 kDa utilizzando lisati cellulari stimolati con insulina o trattati con pervanadato per confermare la specificità per la forma fosforilata.
• Nell'IF/ICC, ottimizzare le condizioni di permeabilizzazione e fissazione (ad esempio, 4% di PFA seguito da metanolo) per mantenere l'epitopo fosforilato; eseguire la co-colorazione con un anticorpo totale contro PI3K p55 per valutare la dinamica di attivazione.
• Dato che è riportata la reattività crociata con il topo, l'anticorpo può essere utilizzato per modelli murini; tuttavia, verificare prima le prestazioni nel tessuto o tipo cellulare di interesse.

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