Anticorpo policlonale di coniglio anti-Phospho-PI3K p85α/p55γ/p85β (Y467/Y199/Y464) per WB, ELISA - P27986 / O00459 / Q92569

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della subunità regolatoria PI3K p85α (PIK3R1)

• Codificata dal gene PIK3R1, la subunità regolatoria alfa della fosfatidilinositolo 3-chinasi (p85α) è una proteina adattatrice chiave che contiene domini SH2 e SH3, mediando il reclutamento della subunità catalitica p110 verso i recettori tirosin chinasici attivati sulla membrana plasmatica.
• Attraverso i suoi domini SH2, p85α si lega ai residui di tirosina fosforilati sui recettori dei fattori di crescita attivati (ad esempio FGFR, PDGFR, KIT) e sui substrati del recettore insulinico, accoppiando così p110 alla segnalazione a valle di PI3K/AKT. Riferimenti correlati: PMID:7518429 PMID:17626883 PMID:19805105
• p85α è essenziale per l'assorbimento del glucosio stimolato dall'insulina e la sintesi di glicogeno nei tessuti sensibili all'insulina, collegando l'attività della PI3K all'omeostasi metabolica.
• La proteina modula la risposta cellulare allo stress del reticolo endoplasmatico promuovendo la traslocazione nucleare di XBP1, contribuendo così al miglioramento della tolleranza glucidica in condizioni di sovraccarico metabolico. Riferimenti correlati: PMID:20348923
• L'alternativa splicing genera più isoforme di p85α (ad esempio p55α, p50α): l'isoforma 2 è espressa prevalentemente nel muscolo scheletrico e nel cervello, con livelli più bassi nel rene e nel muscolo cardiaco.
• Subcellularmente, p85α si localizza nel citoplasma, dove esiste come monomero o dimero, e trasloca rapidamente verso i complessi di segnalazione legati alla membrana dopo stimolazione con fattori di crescita.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione su più residui di tirosina (ad esempio Y467), l'acetilazione e l'ubiquitinazione, che regolano la stabilità proteica, i partner di interazione e la terminazione del segnale.
• La proteina è anche implicata nelle interazioni ospite-virus e è classificata con parole chiave come dominio SH2, dominio SH3, fosfoproteina e risposta allo stress, che riflettono i suoi ruoli versatili nella regolazione cellulare.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico corrispondente ai residui intorno alla Y467 della p85α umana; l'anticorpo ha reattività crociata con i siti di fosforilazione equivalenti nella p55γ (Y199) e nella p85β (Y464). Si consiglia di verificare la specificità tramite saggi di competizione peptidica o trattamento con fosfatasi.
• Per il Western blotting, utilizzare lisati cellulari totali preparati con inibitori di fosfatasi per preservare gli epitopi fosforilati. Bande attese: p85α/p85β intorno a 81‑84 kDa e p55γ intorno a 42‑54 kDa. Includere controlli di caricamento appropriati e marcatori di peso molecolare.
• L'anticorpo è stato convalidato per ELISA; per le analisi quantitative, si consiglia di abbinarlo a un anticorpo anti-PI3K totale per normalizzare i livelli di fosforilazione.
• Per confermare la reattività con proteine endogene, testare in linee cellulari di uomo, topo o ratto ben caratterizzate (ad esempio campioni stimolati con insulina o trattati con fattori di crescita) e consultare la letteratura per la dinamica di fosforilazione attesa.

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