Anticorpo Policlonale Anti-Fosfo-PKA C-alpha (PRKACA)-S339 per WB, IP, ELISA - P17612

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PKA C-alpha (PRKACA)

• PKA C-alpha (PRKACA) è la subunità catalitica della proteina chinasi dipendente da cAMP, con l'isoforma onnipresente 1 e l'isoforma 2 specifica per lo spermatozoo, quest'ultima arricchita negli spermatociti pachiteni.
• Fosforila un'ampia gamma di substrati nel citoplasma e nel nucleo, inclusi l'istone H1.4, NFKB1, CDC25B, ABL1, VASP e i fattori di trascrizione GLI, controllando così processi quali la regolazione trascrizionale, la progressione del ciclo cellulare e l'aggregazione piastrinica. Riferimenti correlati: PMID:15642694 PMID:15905176 PMID:16387847 PMID:15178447
• PRKACA agisce come un inibitore critico della via di segnalazione hedgehog fosforilando GLI1/2/3 e OFD1, il che promuove il processamento e impedisce l'attivazione trascrizionale dei geni bersaglio. Riferimenti correlati: PMID:16705181 PMID:33934390 PMID:36202993 PMID:39138140
• Regola negativamente la segnalazione mTORC1 attraverso la fosforilazione di RPTOR e modula anche la segnalazione del calcio tramite la fosforilazione di RYR2. Riferimenti correlati: PMID:31112131 PMID:17693412
• Nella fisiologia riproduttiva, l'isoforma 2 fosforila ABL1 nel flagello dello spermatozoo per promuovere la capacitazione, mentre negli ovociti, PRKACA impedisce la ripresa della meiosi inattivando CDC25B.
• A livello subcellulare, si localizza nel citoplasma, nucleo, membrana cellulare, mitocondri, ciglia, flagello e vescicole secretorie, riflettendo i suoi ruoli pleiotropici nella compartimentazione della segnalazione.
• Le mutazioni patogeniche in PRKACA sono associate alla sindrome di Cushing, e la chinasi è implicata nel cancro attraverso la regolazione delle giunzioni strette e gli effetti anti-invasivi.
• La proteina contiene domini di legame del cAMP e dell'ATP, un sito di miristoilazione per l'ancoraggio alla membrana e molteplici siti di fosforilazione che regolano la sua attività e le sue interazioni.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'anticorpo si rivolge alla S339 fosforilata di PRKACA. Per confermare la specificità per la forma fosforilata, considerare l'uso di lisati cellulari trattati con fosfatasi o il blocco competitivo con l'antigene peptidico non fosforilato.
• Per il Western blotting, è prevista una banda a circa 41 kDa nei campioni umani. Si raccomanda l'ottimizzazione delle condizioni di blocco e della diluizione dell'anticorpo per ridurre il rumore di fondo.
• Nell'immunoprecipitazione (IP) e nell'ELISA, convalidare le prestazioni dell'anticorpo nella specifica matrice di campione e considerare la reattività incrociata con altre isoforme PKA se si utilizzano specie non umane.

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