Anticorpo policlonale di coniglio Anti-Fosfo-PKC mu (S744/748) per WB e ELISA - Q15139

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di PRKD1/PKC mu

• La serina/treonina-proteina chinasi D1 (PRKD1/PKC mu) converte i segnali transitori di diacilglicerolo (DAG) in effetti fisiologici prolungati a valle della PKC, regolando la segnalazione di MAPK8/JNK1 e Ras, l'integrità del Golgi, la sopravvivenza cellulare, la migrazione, la differenziazione e la proliferazione. Riferimenti correlati: PMID:10764790 PMID:12505989 PMID:12637538
• Fosforila l'EGFR su doppi residui di treonina, sopprimendo l'attivazione di JNK indotta da EGF, e fosforila RIN1 per modulare la segnalazione di Ras. Riferimenti correlati: PMID:10523301
• In condizioni di stress ossidativo, la fosforilazione alla Tyr-463 tramite SRC-ABL1 attiva il complesso IKK e NF-kappa-B, promuovendo la sopravvivenza cellulare. Riferimenti correlati: PMID:12505989
• Nell'ipertrofia cardiaca, PRKD1 fosforila HDAC5, innescando l'esportazione nucleare e l'attivazione di MEF2A; media inoltre la fosforilazione di TNNI3, riducendo la sensibilità ai calcio dei miofilamenti. Riferimenti correlati: PMID:18332134
• La via PRKD1-HDAC5 è essenziale per l'angiogenesi indotta da VEGFA; PRKD1 è inoltre necessaria per l'esportazione nucleare di HDAC7 durante la proliferazione e la migrazione endoteliale. Riferimenti correlati: PMID:19211839
• In seguito a stress genotossico, la caspasi-3 scinde PRKD1 all'Asp-378, attivando la sua funzione chinasi e sensibilizzando le cellule all'apoptosi. Riferimenti correlati: PMID:10764790
• PRKD1 fosforila direttamente TRPV1, modula la segnalazione di TLR5 nelle risposte infiammatorie e attiva l'assemblaggio dell'inflammasoma NLRP3. Riferimenti correlati: PMID:15471852 PMID:17442957
• Subcellolarmente, PRKD1 si localizza nel citoplasma, sulla membrana cellulare e nella rete trans-Golgi, dove è fondamentale per la fissione delle vescicole e il traffico secretorio.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico che comprende Ser744 e Ser748 della PKC mu di topo; la specificità dell'anticorpo deve essere verificata utilizzando campioni trattati con fosfatasi o defosforilati.
• Per il Western blotting è prevista una banda intorno ai 102 kDa; si consiglia di utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati e di convalidare il segnale in lisati cellulari pertinenti di uomo, topo o ratto.
• L'applicazione ELISA può essere utilizzata per rilevare i livelli di fosfo-PKC mu; ottimizzare le condizioni di rivestimento e gli anticorpi di rilevazione per il formato specifico del saggio.
• Data la reattività incrociata con più specie, assicurarsi che l'anticorpo sia validato nel tessuto o nella linea cellulare della specie di interesse.
• La fosforilazione a S744/748 è dinamica; includere appropriati controlli di stimolazione (es. forbol estere, fattori di crescita) e inibizione per confermare la specificità del segnale.

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