Anticorpo policlonale coniglio Anti-Fosfo-PKC mu-S910 per WB, ELISA - Q15139

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Serina/treonina chinasi D1 (PKD/PRKD1)

• Serina/treonina chinasi che converte segnali transitori di diacilglicerolo (DAG) in effetti fisiologici prolungati a valle della PKC, regolando le vie MAPK8/JNK1, Ras e NF-kB, ed è essenziale per l'integrità di Golgi e il traffico proteico. Riferimenti correlati: PMID:10764790, PMID:12505989, PMID:12637538
• Fosforila l'EGFR su residui duali di treonina, sopprimendo l'attivazione di MAPK8/JNK1 indotta da EGF e la fosforilazione di JUN. Riferimenti correlati: PMID:10523301
• Regola la sopravvivenza cellulare attivando il complesso IKK e NF-kB sotto stress ossidativo, e media l'apoptosi indotta da genotossicità attraverso il clivaggio della caspasi-3 ad Asp-378. Riferimenti correlati: PMID:10764790, PMID:12505989
• Coinvolto nella migrazione, differenziazione e proliferazione cellulare tramite l'esportazione nucleare di HDAC5/HDAC7, la segnalazione MAPK1/3 e il riciclaggio delle integrine; svolge un ruolo nell'ipertrofia cardiaca, nell'angiogenesi e nella differenziazione degli osteoblasti. Riferimenti correlati: PMID:18332134, PMID:19211839, PMID:18509061
• Nella risposta infiammatoria, fosforila TLR5 e NLRP3, contribuendo all'attivazione di MAPK14 e all'assemblaggio dell'inflammasoma. Riferimenti correlati: PMID:17442957
• La localizzazione subcellulare include il citoplasma, la membrana cellulare e l'apparato di Golgi, con arricchimento alla rete trans-Golgi dove regola la fissione delle vescicole e il traffico secretorio.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, si consiglia un gel SDS-PAGE a gradiente 4–20% per risolvere la proteina di ~102 kDa. Utilizzare un tampone di lisi appena preparato con inibitori delle fosfatasi per preservare il segnale di fosforilazione.
• La diluizione ottimale dell'anticorpo deve essere determinata empiricamente; le diluizioni iniziali tipiche per anticorpi fosfo-specifici variano da 1:500 a 1:1000 per WB.
• Per ELISA, considerare il rivestimento con l'immunogeno peptide fosforilato e l'utilizzo dell'anticorpo per il rilevamento; la pre-adsorbimento con peptide non fosforilato può confermare la specificità.
• Convalidare l'anticorpo nel sistema di campione pertinente; il trattamento con un inibitore delle fosfatasi come la calyculina A o la stimolazione con esteri del forbolo (es. PMA) possono potenziare il rilevamento della PKC mu fosforilata.

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