Anticorpo monoclonale anti-fosfo-PKC (pan) (βII Ser660) per WB, IHC-P, ELISA - P17252 / P05771 / Q05655 / Q02156 / P24723 / Q04759

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di PKC (pan)

• La proteina chinasi C alfa (PRKCA) è una serina/treonina-proteina chinasi attivata dal calcio e dipendente da fosfolipidi e diacilglicerolo (DAG), che regola diversi processi cellulari tra cui proliferazione, apoptosi, differenziazione, migrazione e adesione.
• Svolge un ruolo nella migrazione delle cellule T indotta da chemochine fosforilando DOCK8, portando all'attivazione di CDC42. Riferimenti correlati: PMID:28028151
• PRKCA è coinvolta nella segnalazione dell'angiotensina II fosforilando KLHL3, modulando le interazioni di WNK4 e la regolazione della pressione sanguigna. Riferimenti correlati: PMID:25313067
• Fosforila LRRK1, che a sua volta fosforila le proteine RAB coinvolte nel traffico intracellulare. Riferimenti correlati: PMID:36040231
• La localizzazione subcellulare include citoplasma, membrana cellulare, membrana mitocondriale e nucleo, a seconda del contesto cellulare e degli stimoli.
• La famiglia PKC include diverse isoforme; questo anticorpo, generato contro un peptide fosforilato attorno alla Ser660 di PRKCA, riconosce le forme fosforilate di molteplici isoforme di PKC (alfa, beta, delta, epsilon, eta, theta) a causa della conservazione della sequenza nel motivo "turn".
• La PKC alfa contiene domini regolatori C1 e C2, inclusi i motivi a dita di zinco che legano l'estere di forbolo/DAG, ed è soggetta a molteplici modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione e acetilazione.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Per il Western blot (WB), convalidare l'anticorpo nel proprio sistema di campioni specifico; considerare l'induzione con esteri di forbolo (es. PMA) per stimolare la fosforilazione della PKC.
• Per l'immunoistochimica (IHC) su sezioni in paraffina (IHC-P), le condizioni di recupero dell'antigene potrebbero necessitare di ottimizzazione; gli anticorpi fosfo-specifici spesso richiedono un recupero delicato per preservare la fosforilazione.
• Per ELISA, utilizzare l'anticorpo per rilevare la fosfo-PKC (pan) in lisati cellulari o proteine purificate; includere inibitori della fosfatasi durante la preparazione del campione per mantenere la fosforilazione.
• Confermare la specificità trattando i campioni con lambda fosfatasi o utilizzando la competizione con peptide non fosforilato.

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