Anticorpo policlonale coniglio anti-Fosfo-PKR/EIF2AK2-T446 per WB, IF/ICC, ELISA - P19525

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PKR/EIF2AK2

• Serina/treonina-proteina chinasi dipendente da dsRNA indotta da IFN che fosforila EIF2S1/eIF-2-alpha, portando all'inibizione della traduzione globale e svolgendo un ruolo chiave nella risposta immunitaria innata all'infezione virale. Riferimenti correlati: PMID:18835251 PMID:19189853 PMID:19507191

• Inibisce la replicazione virale tramite la risposta allo stress integrata (ISR) convertendo EIF2S1 in un inibitore della traduzione globale e promuovendo la traduzione di ATF4; esercita un'ampia attività antivirale contro virus a DNA e RNA, tra cui HCV, HBV, virus del morbillo e HSV-1. Riferimenti correlati: PMID:19189853 PMID:21123651 PMID:22948139 PMID:11836380 PMID:19840259

• Fosforila vari substrati tra cui p53/TP53, PPP2R5A, DHX9, ILF3, IRS1 e la proteina virale US11, regolando così la trasduzione del segnale, l'apoptosi, la proliferazione cellulare e la differenziazione. Riferimenti correlati: PMID:11836380 PMID:19229320 PMID:22214662

• Funziona anche come tirosina-proteina chinasi, fosforilando CDK1 a Tyr-4 in risposta al danno del DNA per promuovere la sua ubiquitinazione e degradazione proteasomiale. Riferimenti correlati: PMID:20395957

• Modula vie di segnalazione multiple: attiva NF-kappa-B tramite interazione con le proteine IKBKB e della famiglia TRAF, attiva la chinasi MAP p38 tramite MAP2K6 e regola i fattori di trascrizione (JUN, STAT1/3, IRF1, ATF3) coinvolti nell'espressione di citochine pro-infiammatorie e IFN. Riferimenti correlati: PMID:22948139 PMID:23084476 PMID:23372823 PMID:10848580 PMID:15121867 PMID:15229216

• Agisce come regolatore duale della via di segnalazione dell'insulina: negativamente tramite fosforilazione inibitoria di IRS1 a Ser-312 e positivamente fosforilando PPP2R5A, che attiva FOXO1 e aumenta la regolazione di IRS2. Riferimenti correlati: PMID:20685959

• Regola l'assemblaggio e l'attivazione degli infalmasomi NLRP3, NLRP1, AIM2 e NLRC4. Riferimenti correlati: PMID:22801494

• Predominantemente citoplasmatica con localizzazione nucleare e perinucleare; altamente espressa nel timo, nella milza e nel midollo osseo; livelli elevati nei carcinomi mammari e del colon correlano con la progressione del tumore; colocalizza con GSK3B e TAU nel cervello colpito dalla malattia di Alzheimer.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico attorno a Thr446; gli inibitori delle fosfatasi nei tamponi di lisi sono fondamentali per preservare la fosforilazione durante la preparazione del campione.
• Per il western blot, convalidare la specificità fosfo confrontando i segnali dei lisati trattati con fosfatasi rispetto a quelli non trattati o utilizzando un controllo di blocco con peptide non fosforilato.
• Nell'immunofluorescenza, considerare le condizioni di recupero dell'antigene e includere una controcolorazione nucleare per visualizzare la distribuzione citoplasmatica/perinucleare.
• Quando si applica l'ELISA, abbinare a un anticorpo PKR totale per normalizzare l'abbondanza proteica e valutare i rapporti di fosforilazione.
• La reattività crociata è riportata per umano e mouse; verificare le prestazioni in altre specie prima dell'uso.

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