Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-Fosfo-PLK1-T210 per WB e ELISA - P53350

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PLK1

• La serina/treonina chinasi proteica PLK1, nota anche come chinasi 1 di tipo polo e STPK13, è un regolatore principale di molteplici eventi durante la mitosi, inclusa la maturazione del centrosoma, l'assemblaggio del fuso, la transizione G2/M, la funzione del cinetocoro, la coesione delle cromatidi sorelle, l'uscita mitotica e la citochinesi. Riferimenti correlati: PMID:11202906, PMID:12207013, PMID:12447691
• Al centrosoma, PLK1 fosforila substrati chiave come KIZ, NEDD1 e NINL per promuovere il reclutamento del complesso ad anello della γ-tubulina e la formazione del fuso bipolare. Riferimenti correlati: PMID:16980960, PMID:19509060, PMID:12852856
• Durante l'uscita mitotica e la citochinesi, PLK1 crea i propri siti di ancoraggio sulle proteine del fuso centrale (PRC1, KIF20A/MKLP2) e fosforila ECT2, CEP55 e RACGAP1 per orchestrare la formazione del solco di scissione. Riferimenti correlati: PMID:12939256, PMID:16247472, PMID:17351640, PMID:19468300, PMID:19468302
• Un regolatore critico del punto di controllo G2/M, PLK1 attiva CDK1 fosforilando CDC25C, ciclina B1 e il fattore di trascrizione FOXM1, inibendo simultaneamente i regolatori negativi WEE1 e PKMYT1/MYT1. Riferimenti correlati: PMID:11202906, PMID:12447691, PMID:12524548, PMID:19160488
• Al cinetocoro, PLK1 mantiene la segnalazione del punto di controllo dell'assemblaggio del fuso e la coesione delle cromatidi sorelle fosforilando BUB1B/BUBR1, FBXO5/EMI1, STAG2/SA2 e SGO1. Riferimenti correlati: PMID:15148369, PMID:15469984, PMID:17376779, PMID:18331714
• Oltre alla mitosi, PLK1 contribuisce al recupero dai danni al DNA e al silenziamento dei punti di controllo fosforilando MRE11, RAD51, POLQ e RHNO1, e regola negativamente la stabilità di p53 tramite la segnalazione TOPORS. Riferimenti correlati: PMID:18615013, PMID:18662541, PMID:37440612, PMID:37674080, PMID:19473992
• PLK1 si localizza nel nucleo, centrosoma, cinetocoro, fuso e corpo centrale durante la divisione cellulare ed è altamente espresso nella placenta e nel colon. È classificata come una fosfoproteina e una serina/treonina chinasi proteica con ruoli nel ciclo cellulare e nella divisione cellulare (UniProt KB - P53350).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è stato sviluppato contro un peptide fosforilato sintetico attorno a Thr210; pertanto, riconosce specificamente la forma fosforilata di PLK1. Confermare la specificità del segnale trattando i lisati con λ-fosfatasi o utilizzando mutanti Thr210 non fosforilabili.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è di ~68 kDa, ma il fosfo-PLK1 mitotico può presentare spostamenti di mobilità. Utilizzare lisati di cellule bloccate in mitosi (es. trattamento con nocodazolo) come controllo positivo e cellule in interfase come controllo negativo.
• Nelle applicazioni ELISA, l'anticorpo può fungere da reagente di cattura o rilevamento per quantificare i livelli di fosfo-PLK1 (Thr210). Ottimizzare il tampone di rivestimento, la concentrazione dell'anticorpo e il substrato di rilevamento per il formato specifico della piastra.
• La reattività incrociata è stata convalidata solo con PLK1 umano. Quando si lavora con altre specie, verificare l'omologia di sequenza attorno all'epitopo Thr210 e verificare sperimentalmente la reattività.
• Per preservare l'integrità dell'epitopo fosforilato, trattare i campioni con inibitori delle fosfatasi ed evitare la conservazione prolungata dei lisati arricotti di fosfoproteine.

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