Anticorpo policlonale rabbit Anti-Fosfo-PPP1CA (T320) per WB, IHC-P, ELISA - P62136

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PPP1CA

• Identità proteica e formazione dioloenzimi: Subunità catalitica della serina/treonina-proteina fosfatasi PP1-alfa che si associa a oltre 200 proteine regolatorie per formare oloenzimi specifici per substrato, defosforilando centinaia di bersagli biologici (PubMed:28216226, 30158517, 35768504).
  Riferimenti correlati: PMID:28216226, PMID:30158517, PMID:35768504

• Funzioni cellulari principali: Essenziale per la divisione cellulare, l'allungamento della trascrizione, il metabolismo del glicogeno, la contrattilità muscolare e la sintesi proteica (PubMed:35768504, 35830882, 35831509). Regola inoltre le conduttanze ioniche, la plasticità sinaptica a lungo termine e la defosforilazione postsinaptica di CaMKII.
  Riferimenti correlati: PMID:35768504, PMID:35830882, PMID:35831509

• Regolazione della trascrizione tramite complesso PNUTS-PP1: Componente catalitica del complesso PNUTS-PP1 che media la pausa-rilascio e la terminazione della RNA polimerasi II defosforilando fattori come AFF4, CDK9, SUPT5H (PubMed:39603239, 39603240, 31677974). Promuove inoltre la degradazione di RNAPII in caso di stress replicativo e regola la struttura della cromatina durante la transizione mitosi-interfase (PubMed:33264625, 20516061).
  Riferimenti correlati: PMID:39603239, PMID:39603240, PMID:31677974, PMID:33264625, PMID:20516061

• Localizzazione subcellulare: Presente nel citoplasma, nel nucleo (nucleoplasma e nucleolo) e nella densità postsinaptica, in linea con i suoi molteplici ruoli regolatori.

• Modificazioni post-traduzionali e legame di metalli: È una proteina fosforilata e acetilata che richiede manganese (Mn²⁺) come cofattore per la sua attività idrolasica.

• Coinvolgimento nelle vie di segnalazione chiave: Agisce come fosfatasi centrale nel complesso SHOC2-MRAS-PP1c (SMP) per defosforilare e attivare le chinasi RAF, stimolando la via MAPK (PubMed:35768504, 35830882, 35831509, 36175670). Defosforila inoltre FOXP3 nelle cellule Treg, CENPA, ATG16L1 e i sensori immunologici innati IFIH1/MDA5 e RIG-I (PubMed:23396208, 25556658, 26083323, 23499489).
  Riferimenti correlati: PMID:35768504, PMID:35830882, PMID:35831509, PMID:36175670, PMID:23396208, PMID:25556658, PMID:26083323, PMID:23499489

• Ulteriori ruoli biologici: Regola il ritmo circadiano bilanciando l'attività di CSNK1D/E e la fosforilazione di PER (PubMed:21712997). È inoltre coinvolto nello sviluppo embrionale (chiusura del tubo neurale, chiusura della fessura ottica, migrazione ENCC; per similarità) e necessario per la replicazione degli alphavirus.
  Riferimenti correlati: PMID:21712997

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'anticorpo è stato prodotto contro un peptide fosforilato sintetico corrispondente alla regione Thr320 di PPP1CA umano; per la rilevazione specifica di PPP1CA fosforilato in questo sito è necessario mantenere la fosforilazione durante la preparazione del campione. Si consiglia di aggiungere inibitori di fosfatasi nei tamponi di lisi.
• Per Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 38 kDa; ci si aspetta una banda vicino a questa dimensione nei campioni rilevanti. Possono comparire bande non specifiche a seconda del tipo di campione e della concentrazione dell'anticorpo; si raccomanda di ottimizzare la diluizione dell'anticorpo primario.
• La reattività crociata con mouse e ratto è prevista in base alla conservazione della sequenza; tuttavia, si consiglia la validazione nella specie e nel tessuto bersaglio prima di condurre studi quantitativi.
• Per IHC-P, le condizioni di recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo devono essere ottimizzate in base al tipo di tessuto. Per ELISA, si consiglia di utilizzare un controllo di peptide non fosforilato per confermare la specificità.

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