Anticorpo policlonale coniglio anti-Fosfo-PPP2CA/PPP2CB-Y307 per WB, ELISA - P67775 / P62714

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PPP2CA/PPP2CB

• PPP2CA codifica l'isoforma alfa della subunità catalitica della fosfatasi 2A delle proteine serina/treonina (PP2A), un enzima chiave che regola numerosi pathway di segnalazione e processi cellulari.
• La PP2A funziona come la principale fosfatasi per le proteine associate ai microtubuli (MAP) e modula chinasi come la chinasi B del fosforilasi, la chinasi 2 della caseina e la chinasi MAP-2 (PubMed:22613722). Riferimenti correlati: PMID:22613722
• Defosforila un'ampia gamma di substrati tra cui l'antigene grande T di SV40, AXIN1, p53/TP53, PIM3, WEE1, MYC, FOXO3 e AKT1, controllando così la crescita cellulare, l'apoptosi e le risposte immunitarie (PubMed:10801873, PubMed:12473674, PubMed:17245430, PubMed:25438055, PubMed:30513302). Riferimenti correlati: PMID:10801873, PMID:12473674, PMID:17245430, PMID:25438055, PMID:30513302
• La PP2A è un componente critico dei complessi STRIPAK, che regolano i pathway Hippo, MAPK, i recettori nucleari e il rimodellamento del citoscheletro coinvolti nella crescita e differenziazione cellulare (PubMed:33633399). Riferimenti correlati: PMID:33633399
• Come parte del complesso Integrator-PP2A (INTAC), PPP2CA defosforila il dominio C-terminale della RNA polimerasi II e SUPT5H/SPT5, mediando la terminazione trascrizionale prematura e il controllo qualità durante l'allungamento (PubMed:33243860, PubMed:34004147, PubMed:37080207). Riferimenti correlati: PMID:33243860, PMID:34004147, PMID:37080207
• Si localizza nel citoplasma, nucleo, centromeri e poli del fuso, riflettendo le sue diverse funzioni nella mitosi, meiosi e regolazione trascrizionale.
• La proteina è soggetta a multiple modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione, metilazione e ubiquitinazione, e contiene siti di legame per ioni ferro, manganese e zinco.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Dato che l'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato a Y307, assicurarsi che i tamponi di blocco e di rilevamento siano ottimizzati per anticorpi fosfo-specifici per mantenere il riconoscimento dell'epitopo.
• Per il Western blot, trattare i campioni con inibitori delle fosfatasi per preservare lo stato di fosforilazione; includere un controllo positivo (es. cellule trattate con pervanadato) per confermare la fosfo-specificità.
• Per l'ELISA, considerare il rivestimento con il peptide fosforilato e l'uso di un anticorpo secondario anti-coniglio per il rilevamento. Validare la reattività incrociata con campioni murini come indicato.
• Quando si esegue il WB, il peso molecolare atteso per PPP2CA è di circa 36 kDa; notare che PPP2CB potrebbe migrare in modo simile.

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