Anticorpo policlonale di coniglio Anti-Fosfo-PTK2B (Y402) per WB, IF/ICC, ELISA - Q14289

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della proteina tirosina chinasi 2-beta

• Proteina tirosina chinasi non recettoriale che regola la riorganizzazione del citoscheletro di actina, la polarizzazione cellulare, la migrazione, l'adesione, l'espansione cellulare e il rimodellamento osseo.
• Svolge un ruolo nella risposta immunitaria umorale, essendo richiesto per livelli normali di linfociti B marginali nella milza e per la migrazione dei linfociti B splenici; regola inoltre la polarizzazione dei macrofagi e le risposte dei linfociti T.
• Promuove il riassorbimento osseo osteoclastico tramite cooperazione con la chinasi SRC e può inibire la differenziazione delle cellule osteoprogenitrici.
• Funziona a valle di un'ampia gamma di recettori, tra cui recettori per integrine, recettori immunitari, accoppiati a proteine G, per citochine, chemochine e fattori di crescita, e media le risposte allo stress cellulare.
• Dopo l'attivazione, forma complessi di segnalazione con SRC e chinasi della famiglia SRC, portando alla fosforilazione di ulteriori residui di tirosina che creano siti di legame per proteine scaffold, effettori e substrati.
• Attiva molteplici vie di segnalazione a valle, tra cui PI3K/AKT1, le cascate delle MAP chinasi (ERK, JNK) e le GTPasi della famiglia Rho (RHOA, RAC1), controllando così diversi processi cellulari.
• Contribuisce alla regolazione dell'attività del canale ionico del recettore NMDA e dei livelli di calcio intracellulare promuovendo la fosforilazione dei recettori NMDA mediata da SRC.
• È più abbondante nel cervello, in particolare nell'amigdala e nell'ippocampo; è espresso anche nella milza, nei linfociti e a livelli più bassi nel rene. A livello subcellulare, si localizza nel citoplasma, nelle adesioni focali, nei lamellipodi, nella corteccia cellulare e nel nucleo.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico corrispondente alla tirosina 402 di PTK2B umana; la specificità per la forma fosforilata deve essere confermata tramite trattamento con fosfatasi o controlli con peptide bloccante non fosforilato.
• Per il Western blotting, includere inibitori di fosfatasi nei buffer di lisì per preservare la fosforilazione e valutare l'utilizzo di un anticorpo anti-PTK2B non fosforilato come controllo di carico per verificare il segnale dipendente dalla fosforilazione.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, le condizioni di fissazione e permeabilizzazione devono essere ottimizzate per il tipo cellulare; la co-colorazione con un anticorpo pan-PTK2B può aiutare a confermare la localizzazione fosfo-specifica.
• Per applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rivelazione; validare con peptidi fosforilati e non fosforilati per garantire la specificità nel sistema di saggio utilizzato.
• L'anticorpo presenta reattività crociata con PTK2B di uomo, topo e ratto secondo i dati del fornitore; in ogni caso, prima di studi quantitativi si raccomanda la validazione nella specie specifica e nel contesto sperimentale utilizzato.

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