Anticorpo policlonale coniglio Anti-Fosfo-Raptor-Ser792 per WB e ELISA - Q8N122

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Fosfo-Raptor (Ser792)

• Raptor (RPTOR), noto anche come KIAA1303 o RAPTOR, è la proteina regolatoria associata a mTOR e un componente centrale del complesso mTORC1.
• Come sensore chiave dei nutrienti, mTORC1 promuove i processi anabolici (sintesi di proteine, lipidi, nucleotidi) e inibisce le vie cataboliche (autofagia) fosforilando substrati come RPS6KB1 e EIF4EBP1. Riferimenti correlati: PMID:12150925 PMID:12150926 PMID:12747827
• Raptor agisce da adattatore molecolare all'interno di mTORC1, mediano il reclutamento lisosomiale tramite le GTPasi Rag e indirizzando i substrati contenenti il motivo TOS al dominio chinasi di MTOR. Riferimenti correlati: PMID:12747827 PMID:24403073 PMID:26588989
• Subcellolarmente, Raptor si localizza sulla membrana del lisosoma, nel citoplasma e nei granuli citoplasmatici, in linea con il suo ruolo di segnalazione.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione, che regolano l'attività di mTORC1; il residuo Ser792 riconosciuto da questo anticorpo si trova all'interno di una regione fosforilata regolata.
• L'espressione tissutale è ampia, con i livelli più alti nel muscolo scheletrico, nella mucosa nasale e nell'ipofisi, ed è rilevabile anche nel cervello, polmone, rene e placenta.
• L'eplicing alternativo genera isoforme, e la proteina contiene ripetizioni WD che mediano le interazioni proteina-proteina.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Per l'analisi Western blot, aggiungere inibitori di fosfatasi nei buffer di lisci per preservare la fosforilazione di Ser792; valutare il trattamento delle cellule con modulatori della via mTOR (es. rapamicina, deprivazione di amminoacidi) per verificare la specificità del segnale.
• Verificare la specificità della banda tramite competizione antigenica utilizzando il peptide fosforilato immunogeno rispetto al corrispondente non fosforilato nel proprio sistema di campioni.
• Utilizzare un gel di trasferimento ad alta percentuale e tempi di trasferimento prolungati per la proteina full-length di 149 kDa, e validare sempre nel tessuto o linea cellulare di interesse umano o murino.
• Per le applicazioni ELISA, ottimizzare le condizioni di rivestimento e utilizzare una strategia di rilevamento specifica per fosfati; la reattività crociata con Raptor non fosforilato deve essere esclusa empiricamente.

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