Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Fosfo-RB-S780 per IHC-P, ELISA - P06400

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e localizzazione della proteina associata al retinoblastoma (RB1)

• RB1, o proteina associata al retinoblastoma, è un soppressore tumorale che regola strettamente il checkpoint del ciclo cellulare G1/S legandosi e inibendo i fattori di trascrizione E2F (PubMed:10499802). Riferimenti correlati: PMID:10499802
• La fosforilazione di RB1 mediata da chinasi ciclina-dipendenti (CDK), incluso Ser780, porta al suo distacco da E2F, dereprimendo i geni essenziali per l'ingresso in fase S (PubMed:10499802). Riferimenti correlati: PMID:10499802
• La fosforilazione da parte di CDK3/ciclina‑C guida anche la transizione G0‑G1 (PubMed:15084261). Riferimenti correlati: PMID:15084261
• RB1 contribuisce alla stabilità dell'eterocromatina reclutando metiltransferasi istoniche (SUV39H1, KMT5B/C) e controllando la trimetilazione di H4K20.
• A livello subcellulare, RB1 è prevalentemente nucleare ma può spostarsi nel citoplasma; è espressa nella retina e nei cheratinociti.
• Modificazioni post‑traduzionali come fosforilazione, acetilazione e metilazione modulano finemente la sua attività repressiva e le interazioni proteiche.
• Le oncoproteine virali (SV40 large T, HPV E7, adenovirus E1A) interrompono i complessi RB1‑E2F, abrogando la funzione soppressiva tumorale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosfo‑sintetico che comprende Ser780 di RB1 umano. Per IHC‑P, considerare l'uso di recupero dell'antigene e inibitori della fosfatasi per preservare la fosforilazione.
• Confermare la specificità confrontando la colorazione con un anticorpo anti-RB1 non fosfo-specifico o tramite trattamento con fosfatasi.
• L'anticorpo reagisce in modo incrociato con topo e ratto; validarlo nel tessuto o modello cellulare appropriato per il vostro studio.
• Per ELISA, includere controlli con peptide sia fosforilato che non fosforilato per valutare la specificità fosfo.
• Poiché RB1 è una proteina nucleare, passaggi di arricchimento nucleare possono migliorare la sensibilità di rilevamento.

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