Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Fosfo-RB (Ser780) per WB, IHC-P, ELISA - P06400

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RB1

• La proteina associata al retinoblastoma (RB1) è un soppressore tumorale e un regolatore chiave della transizione G1/S del ciclo cellulare. Agisce legandosi ai fattori di trascrizione E2F, reprimendo la trascrizione dei geni necessari per l'ingresso nella fase S. Riferimenti correlati: PMID:10499802
• La fosforilazione di RB1 da parte delle chinasi ciclina-dipendenti (CDK) porta alla dissociazione da E2F, attivando così la trascrizione e promuovendo la progressione del ciclo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:10499802
• RB1 facilita anche la transizione G0-G1 dopo fosforilazione da parte di CDK3/ciclina-C. Riferimenti correlati: PMID:15084261
• Coinvolta direttamente nella formazione dell'eterocromatina mantenendo la struttura della cromatina e stabilizzando la metilazione degli istoni, reclutando metiltransferasi degli istoni come SUV39H1.
• La localizzazione subcellulare include il nucleo e il citoplasma, coerente con i suoi ruoli nella regolazione trascrizionale e nel controllo del ciclo cellulare.
• Esprime in retina e cheratinociti del prepuzio, con un'ampia distribuzione tissutale che riflette la sua funzione fondamentale nel ciclo cellulare.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, acetilazione e metilazione, che modulano la sua attività e le sue interazioni. La sua inattivazione da parte di oncoproteine virali (es. antigene T grande di SV40, E7 di HPV) illustra il suo ruolo centrale nel controllo della crescita.

Linee Guida Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico corrispondente alle sequenze attorno alla Ser780 di RB umano. Per confermare la specificità per la forma fosforilata, includere nei saggi lisati trattati con fosfatasi o competere con il peptide non fosforilato.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 106 kDa in condizioni riducenti. Utilizzare controlli positivi (es. cellule in ciclo) e negativi (es. cellule private di siero o carenti di RB) appropriati per verificare l'identità della banda.
• In IHC-P, le condizioni di recupero dell'antigene (es. tampone citrato pH 6.0 o EDTA pH 9.0) e la diluizione dell'anticorpo devono essere ottimizzate in base al tipo di tessuto. Una colorazione co-istologica con un anticorpo anti-RB totale può aiutare a valutare lo stato di fosforilazione nel contesto tissutale.
• L'anticorpo è segnalato reagire in modo crociato con RB di topo e ratto; tuttavia, si raccomanda la validazione nella specie e nel sistema sperimentale pertinenti.
• Per l'ELISA, considerare di utilizzare come antigene di rivestimento il peptide fosforilato e verificare la specificità contro il peptide non fosforilato.

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