Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-Fosfo-RIPK1 (S166) per WB, ELISA - Q13546

Specifiche e parametri principali del prodotto

Informazioni biologiche: Funzione e localizzazione della proteina chinasi serina/treonina interagente con recettore 1

• RIPK1, noto anche come RIP, RIP-1 o proteina della morte cellulare RIP, è una serina-treonina chinasi codificata dal gene RIPK1; lo splicing alternativo produce più isoforme proteiche.
• Agisce come regolatore chiave dell'apoptosi mediata da TNF, della necroptosi e delle vie infiammatorie. Riferimenti correlati: PMID:17703191, PMID:24144979, PMID:31827280.
• RIPK1 svolge funzioni dipendenti dall'attività chinatica che controllano la morte cellulare e funzioni di scaffold indipendenti dall'attività chinatica che promuovono la segnalazione infiammatoria e la sopravvivenza cellulare. Riferimenti correlati: PMID:11101870, PMID:19524512, PMID:19524513.
• Dopo stimolazione con TNF, RIPK1 viene reclutato nel complesso di segnalazione di TNF-R1 (complesso I) dove agisce come scaffold per attivare la NF-κB canonica e promuovere la sopravvivenza cellulare.
• L'attività chinatica di RIPK1 guida l'assemblaggio di complessi inducenti la morte: il complesso IIa (RIPK1-FADD-CASP8) per l'apoptosi e il complesso IIb (RIPK1-RIPK3-MLKL) per la necroptosi.
• RIPK1 fosforila RIPK3, portando a una autofosforilazione e trans-fosforilazione reciproca. Riferimenti correlati: PMID:19524513.
• Fosforila DAB2IP alla Ser-728, attivando così la cascata apoptotica MAP3K5-JNK. Riferimenti correlati: PMID:15310755, PMID:17389591.
• Subcellularmente, RIPK1 si trova nel citoplasma ed è associato alla membrana cellulare; subisce fosforilazione, ubiquitinazione e altre modifiche post-traduzionali che regolano le sue funzioni di segnalazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato corrispondente ai residui intorno alla serina 166 di RIPK1 umano; pertanto, l'anticorpo riconosce specificamente RIPK1 quando è fosforilato in questo sito.
• Per il Western blotting, utilizzare lisati di linee cellulari o tessuti umani, poiché è riportato che l'anticorpo reagisce con RIPK1 umano; considerare di includere inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare la fosforilazione.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere l'ottimizzazione delle condizioni di rivestimento e la rilevazione di RIPK1 fosforilato in lisati cellulari o proteine ricombinanti; validare con controlli positivi e negativi per la fosforilazione.
• Il peso molecolare previsto di RIPK1 è di ~75 kDa; tuttavia, le modifiche post-traduzionali possono causare leggere variazioni nella migrazione.

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